中华绒螯蟹血淋巴细胞钙激活钾通道研究-海洋科学.PDFVIP

1 2 1,2 , , (1. , 300387; 2. , 300221) 摘要利用膜片钳技术之内面向外式, 对培养 2~24 h 不同类型的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血淋巴 细胞表达的钙激活钾 (KCa)通道进行种类鉴别和特征研究。结果表明：在高对称钾溶液 (200 mmol/L) 中, 只有小颗粒细胞表达大电导钙激活钾 (BKCa)通道和中电导钙激活钾 (IKCa)通道。其中 BKCa 通道 电导为 396 pS, 通道的开放活动表现为矩形方波。同一钳制电压下, 当浴液中[Ca2+]在 0.3~3.0 μmol/L 范围内, 通道开放概率和开放数目随 Ca2+ 浓度增加而增加, 当浴液中[Ca2+]达到 100.0 μmol/L, 通道开 放受到抑制, 表现明显的钙依赖性失活; 当浴液中Ca2+ 浓度为 3.0 μmol/L, 钳制电压分别为－40 mV 和 －80 mV 时, 通道平均开放时间分别为(0.032 33±0.007 41) s 和(0.055 85±0.012 99) s (P0.01), 平均开 放概率分别为 0.596±0.125 和 0.961±0.012 (P0.01), 说明通道开放具有电压依赖性。IKCa 通道电导为 88 pS, 开放活动也表现为矩形方波。当浴液中 Ca2+ 浓度为 0.3 、1.0μmol/L 时, 通道不开放; 而 Ca2+ 浓 度为 3.0 μmol/L 时通道开放, 说明通道具有明显的钙依赖性, 钳制电压分别为－40 mV 和－80 mV 时, 通道平均开放时间分别为(0.017 36±0.004 03)s 和(0.022 62±0.016 16)s (P0.05), 平均开放概率分别为 0.699±0.065 和 0.790±0.114 (P0.05), 说明通道开放不具有明显的电压依赖性。药理学研究结果表明, 40 mmol/L 四乙铵 (TEA)灌流 15 min 能完全阻断 KCa 通道活动。这提示钙激活钾通道在甲壳动物细胞免 疫中发挥重要作用。 关键词中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis); 血淋巴细胞; 钙激活钾通道; 膜片钳; 内面向外式 中图分类号Q424, Q915.819 文献标识码A 文章编号1000-3096(2010)05-0055-07 Ca2+, SKCa IKCa , [1] [6] , T B , , , , , K+, (Eriocheir sinensis), , ,