α-CD-PAMAM抗血清阳离子聚合物的构建及其作为基因-药学学报.PDFVIP

a-CD- PAMAM 血清阳离子聚合物的构建及其作为基因载 体的性能评价 1,2 1 3 1* 秦凌浩 ，曹端文 ，潘仕荣 ，陈建海 （1 南方医科大学南方医院，广东 广州 510515；2 广东药科大学，广东 广州 510006； 3 中山大学附属第一医院，广东 广州 510080） 摘要 本文合成了一种a-环糊精（a-cyclodextrin ，a-CD ）与聚酰胺-胺 （polyamidoamine，PAMAM ）的接枝聚合物(CyD-G 1)。1H 核磁测试结果表明， 每个环糊精分子上平均接枝了 6.4 个 PAMAM-G1 分子。凝胶电泳结果显示， CyD-G1 可以有效结合DNA ，并保护DNA 免于核酸酶DNase Ⅰ的降解。当载体 与DNA 的复合物的N/P 比为40 时，可以压缩DNA 形成平均粒 为120 nm 左 右的粒子，复合物表面的zeta 电位约为+21 mV 。该复合物可以在血清存在的条 件下保持粒子的完整性并在 360 min 内稳定性良好。与 PEI-25K 载体相比， CyD-G1 在高浓度时仍表现出较低的细胞毒性。将CyD-G1 与市售Lipofectamine 2000 和PEI-25K 对比转染发现，CyD-G1/DNA 复合物在多种细胞系中具有较高 的转染率，而且转染水平不受血清影响。通过激光共聚焦观察并结合流式细胞分 析表明，该阳离子聚合物介导 DNA 可以在 4h 内有效进入细胞核内。上述结果 证明，该阳离子聚合物作为一种非病毒型基因传递系统具有优良的性能以及体内 给药应用的潜在可行性。 关键词：环糊精；聚酰胺-胺；抗血清；基因载体 中图分类号：R943 文献标识码: A 文章编号：0513-4870(2016) 收稿日期：2016-08-10；修回日期：2016-10-31 基金项目：国家自然科学基金资助 8 1173013 ） 通讯作者：Tel: Fax: E-mail: j hchen06@126.com 1 Construction of serum-resistant cationic polymer a-CD- PAMAM and evaluation of its performances as gene delivery vector 1,2 1 3 1* QIN Ling-hao , CAO Duan-wen , PAN Shi-rong ，CHEN Jian-hai (1. Nanf ang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2. Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 3. The First Affil iated Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, China ） Abstract: Polyamidoamine (PAMAM) dendrimers as synthetic gene vectors have been proved to be efficient gene delivery systems. In this study, a kind of -cyclodextrin-PAMAM