大岩桐的组织培养和快繁技术的研究.docVIP

大岩桐的组织培养和快繁技术的研究 韩云花　师春娟 李平英　董菊兰 王齐 摘 要：以大岩桐的新生嫩叶为外植体，进行了植株再生和快速繁殖的研究。结果表明：诱导不定芽以MS+NAA0.05mg/L+6-BA0.5mg/L效果最好，分化率达100％；增殖培养以MS+BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L增殖率最高，达6.5倍；再生苗在1/2MS+NAA0.1mg/L培养基上生根效果最好，能够达到植株再生和快繁的目的。 关键词：大岩桐 组织培养 快速繁殖 Study on the tissue culture and plant regeneration of Sinningiaspeciosa HAN Yun-Hua1 SHI Chun-Juan1 LI Ping-Ying1 DONG Ju-Lan1 WANG Qi2 (1.The Forestry Science Institute of Xiaolongshan,Gansu Tianshui 741022; 2.College of Grassland Science, Gansu Agricultural university, Lanzhou 730070) Abstract: The research that take the new tender leaf of Sinningiaspeciosa as explant, plant regeneration and speeding-reproduce was studied. the results showed that the temperate culture medium of callus induction is: MS+NAA0.05mg/L+6-BA0.5mg/L. it reaches to 100％; the temperate culture medium of multiplication is: MS+BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L, it may reach 6.5 times more; regeneration plants grow roots fastest on the culture medium with 1/2MS+NAA0.1mg/L. it can realize the aim of plant regeneration and speeding-reproduce. Key words: Sinningiaspeciosa; tissue culture; plant regeneration 大岩桐（Sinningiaspeciosa）又名落雪泥，原产巴西，属苦苣科苦苣苔属多年生草本植物，其花朵大而鲜艳，花期长，色彩丰富，有较高的观赏性，是著名的温室盆栽花卉。由于大岩桐为异花授粉植物，种子不易得，因此用种子繁殖受到一定程度的限制，而常规繁殖方法远远不能满足人们的需要[1-2]。通过组织培养可取得保持原有品种优良性状的大批优质苗。 1 材料与方法 1.1 试验材料 盆栽大岩桐。选取花朵硕大、生长健壮、无病虫害的新生嫩叶作为外植体进行初培。 1.1 试验方法 试验从2002年3月22日开始，对选取的外植体用洗衣粉、洗洁剂冲洗数次以后用清水冲洗干净，在超净工作台上选用75％的乙醇溶液浸泡15s作表面消毒处理，再用0.1％的Hgcl2(附加1～2滴吐温）浸泡5min，并不断轻摇使其浸泡充分，彻底灭菌，最后用无菌水冲洗4～5次，再用灭过菌的滤纸吸干水分，用利刀将叶片切成边长5～7mm的小方块，接到培养基中，为减少损失，增加得率，最好每瓶只接一块材料。 诱导分化培养基为MS+3%+0.5%琼脂粉，附加不同浓度的NAA、6-BA激素配比（表1）；不定芽诱导培养基为MS+3%蔗糖＋0.5％琼脂粉，附加不同浓度的NAA、6-BA激素配比（表2）；生根诱导培养基为1/2MS+1.5%蔗糖＋0.5％琼脂粉，附加不同浓度的NAA激素配比（表3）。PH5.8，光照强度1000～2000LX，光照时间10～12h，培养温度（25±2）℃。 2 分析与讨论 2.1 不定芽诱导 将无菌外植体接入附加三种不同浓度激素配比的诱导培养基中（表1），每处理接种10个，三次重复，10d后，叶片开始膨大，20d后，叶面上产生了致密的淡黄色愈伤组织，而且上面长有3～4个芽；经30d的培养，形成了较密集的丛生芽。 表1　 不同浓度NAA.6-BA对大岩桐不定芽诱导形成的影响 NAA （ mg/L） 6－BA外植体数分化数分化率 平均芽数