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克隆基因
克隆基因的制备方法及原理 ;目录;克隆的介绍; 克隆技术 又称为“生物放大技术”，它经历了三个发展时期： ⑴ 微生物克隆时期，即用一个细菌可以很快 复制出成千上万个和它一模一样的细菌，从 而变成一个细菌群； ⑵ 生物技术克隆时期，比如用遗传基因一DNA进行克隆； ⑶ 动物克隆时期，即由一个细胞克隆成一个动物。克隆绵羊“多利”就是由一头母羊的体细胞克隆而来，使用的便是动物克隆技术； ;克隆在不同水平上有不同的定义;克隆基因;DNA修饰酶;;;单链核酸内切酶;;;核酸外切酶;;;;;;克隆基因的方法及原理;一 基于基因产物的基因克隆方法;;二 根据基因表达差异（mRNA）克隆基因;差减杂交;; 定义：即利用 DNA 链内退火优先于链间退火,使非目的序列在退火时产生发夹式互补结构,无法与引物配对,从而选择性抑制非目的基因片段的扩增,由此提出了抑制性差减杂交PCR 法。;;差异显示 PCR （DD-PCR);;三 基于基因加标签的基因克隆方法;;;;四 基于基因序列的基因克隆方法 ;1 通过通过分子杂交克隆法 原理：根据基因序列上的同源保守性，从一种生物中分离获得的基因用于制作分子探针，从另一种生物的基因文库中分离出此生物中的同源基因。 2 通过PCR扩增基因法 原理：根据基因序列结构特征，设计基因特异引物，利用PCR技术直接从生物的基因组或是cDNA中扩增出目的基因。;;五 基于基因图谱的基因克隆方法 ;;;;;;
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