p38MAPK在斑马鱼卵母细胞减数分裂恢复中的作用.pdfVIP

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第 44卷 第 1期 淡 水 渔 业 2014年 1月 Vo1.44 No.1 FreshwaterFisheries Jan.2014 p38MAPK在斑马鱼卵母细胞减数分裂恢复中的 作用 丁凤玲 ,魏 华 ,陈阿琴 ,沙晓姣 ,任 周 ,余言想 (1.上海海洋大学 水产与生命科学学院,上海 201306; 2.上海农林职业技术学院动物科学技术系,上海 201600) 摘要:为了阐明p38MAPK(p38丝裂原活化蛋白激酶)的激活在斑马鱼 (Danioredo)卵母细胞第一次减数分裂恢复 中的作用,用卵泡刺激素 (FSH)、SB203580 (p38MAPK抑制剂)、PKA激活剂 forskolin单独作用及 FSH 与 SB203580、FSH与PKA抑制剂H89共同培养斑马鱼卵母细胞。采集不同培养时间的卵母细胞,用 SDS—PAGE 电泳和WesternBlot蛋白质免疫印迹技术检测p38MAPK磷酸化,观察生发泡破裂(GVBD)情况。结果表明,斑马 鱼卵母细胞在FSH诱发下,p38MAPK活性明显升高;单独添加SB203580斑马鱼卵母细胞p38MAPK活性受到明 显抑制 ,同一时间GVBD发生率均低于对照组以及同时添加 FSH与SB203580的实验组;FSH与 SB203580共同 作用组斑马鱼卵母细胞,GVBD发生率与SB203580实验组差异性不显著,与FSH组相比显著降低。用 H89与 FSH共同培养卵母细胞时,虽然 p38MAPK仍被激活但量很少。用forskolin单独培养卯母细胞 ,p38MAPK能被激 活,且比对照组明显升高。结果提示,在FSH诱导的斑马鱼卵母细胞减数分裂恢复过程中p38MAPK被激活 ,且 p38MAPK的激活是PKA依赖性的。 关键词:斑马鱼(Daniorerio);p38MAPK;卵泡刺激素;SB203580;H89;forskolin 中图分类号:$917.4 文献标识码:A 文章编号:1000-6907一(2014)0l-0008-06 Effects0fp38MAPK duringtheresumptionofmeiosisin Daniorerio0ocytes DINGFeng—ling,WEIHua ,CHENA—qin,SHAXiao~iao,RENZhou,YUYah—xiang (1.CollegeofFisheriesandLifeScience,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China; 2.DepartmentofAnimalScienceandTechnology,ShanghaiVocationaland TechnicalCollege AgricultureandForestry, Shanghai201600,China) Abstract:Toclarifytheeffectsofp38mitogen—activatedproteinkinase(p38MAPK)ontheresumptionofthefirstmeio— sisin Danio rerio oocytcs,theoocyteswere cuhured with thefollowing chemicals:no chemical , FSH .SB203580

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