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高灵敏可视化核酸试纸条法快速检测hbvdna-现代生物医学进展
1277 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.11 NO.7 APR.2011 · · 高灵敏可视化核酸试纸条法快速检测HBV DNA* 1 2 3 2 1△ 杨 贤 黄 欢 殷竹君 武海萍 周国华 1 210029 2 210002 （南京医科大学基础医学院江苏南京 ；华东医学生物技术研究所 江苏南京 ； 3 江苏出入境检验检疫局江苏南京200001） 摘要目的：本研究旨在建立一种基于试纸条的快速、灵敏及可视化检测乙型肝炎病毒核酸的方法。方法：利用聚合酶链反应扩增 5 乙肝病毒的保守区，其中上、下游引物的 端分别修饰异硫氰酸荧光素和生物素。核酸试纸条上的胶体金以及检测线处分别标记 10 min 有链霉亲和素以及抗荧光素抗体。将扩增产物与展开液混合后点样， 后即可用肉眼判读结果。在优化了展开液成分、上样 15 33 HBsAg 体积以及上样浓度之后，对该方法的灵敏度进行了评价。最后收集 例阴性样本及 例 阳性样本，按血清标志物结果进 行分类后使用核酸试纸条进行检测，并与实时荧光PCR 的结果进行了比较。结果：试纸条检测乙肝病毒核酸的灵敏度为250 copies/mL。在临床样本的测定中，该方法与实时荧光定量PCR 的特异性均为100%。且两种方法检测不同血清标志物类型的阳性 检出率无差异。结论：核酸试纸条技术能够用于乙肝病毒核酸的可视化检测，与实时荧光PCR 相比检测速度快，具有较好的灵敏 度和特异性，适合流行病学调查以及在基层医院体检使用。 关键词：核酸试纸条法；聚合酶链反应；乙肝病毒DNA R446.5 B 1673-6273 2011 07-1277-05 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Development of a sensitive, visual nucleic acid dipstick assay for rapid detection of hepatitis B virus DNA* 1 2 3 2 1△ YANG Xian , HUANG Huan , YIN Zhu -j un , WU Hai-p ing , ZHOU Guo-hua ( 1 School of Basic Medical Sciences, Nanj ing Medical University, 2 10029, Nanj ing, China; 2 Huadong Research Institute for M
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