两株海洋微生物抗肿瘤代谢产物的筛选及其菌种鉴定-渔业科学进展.pdfVIP

第35 卷 第 6 期 渔 业 科 学 进 展 Vol.35, No.6 2 0 1 4 年 1 2 月 PROGRESS IN FISHERY SCIENCES Dec., 2014 DOI: 10.11758/yykxjz / 两株海洋微生物抗肿瘤代谢产物的 筛选及其菌种鉴定* 1,2 1 1 1 1① 衣 尧 郑兰红 陈世建 盛 军 孙 谧 (1. 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071; 2. 上海海洋大学食品学院 上海 201306) 对5 株海洋微生物进行发酵培养，发酵液离心后，收集上清液，采用饱和正丁醇萃取制备 海洋微生物的代谢产物，采用MTT 活性跟踪法，以BEL-7402 、RKO 、A549 、U251 和MCF-7 等 细胞系为模型，对代谢产物进行抗肿瘤活性的筛选。结果显示，菌株S-1 和N16 代谢产物的活性组 分具有较好的抗肿瘤活性：菌株S-1 对MCF-7 、U251 和BEL-7402 三种肿瘤细胞的IC50 值分别为 44 、102 和82 μg/ml ；菌株N16 对MCF-7 和BEL-7402 两种肿瘤细胞的IC50 值分别为84、133 μg/ml 。 对菌株S-1 和N16 进行了16S rRNA 序列分析、生理生化特征鉴定，结果显示，菌株S-1 为短芽孢 杆菌属(Brevibacillus sp.) ，N16 为芽孢杆菌属(Bacillus sp.) 。通过显微镜观察了菌株Brevibacillus sp. S-1 和Bacillus sp. N16 代谢产物的活性组分对BEL-7402 细胞形态的影响，表明两株菌的活性组分 可以改变肝癌细胞BEL-7402 的细胞形态，抑制细胞增殖。该研究为新型抗肿瘤先导化合物的发现 提供了新的海洋微生物种质资源。 海洋微生物；菌种鉴定；代谢产物；抗肿瘤活性 Q93 文献标识码 A 文章编号 1000-7075(2014)06-0114-06 海洋环境有着特殊的生态条件，比如高盐、低温、 如此，海洋抗肿瘤药物的数量仍然无法与陆生来源的 无光等，形成了海洋微生物基因组成和代谢产物的多 抗肿瘤药物相比。因此，新的抗肿瘤药物的研发仍然 样性(张偲等, 2010; 任虹等, 2010; 薛宝贵等, 2012; 需要寻找更多海洋微生物活性物质。本研究采用 MTT 王英姿等, 2013; Tan et al, 2012) 。因此，海洋微生物 活性跟踪法从 5 株海洋细菌中筛选出两株具有较好 成为寻找具有生物活性的天然产物的重要资源。近 活性的菌株，并测定了其代谢产物粗提物对多种肿瘤 20 年来，从海洋无脊椎动物短头海兔中分离出一种抗 细胞株的IC50 值，这两株菌株的代谢产物对多种肿瘤 肿瘤五肽尾海兔素 10 (Luesch et al, 2001) ，从海洋海鞘 细胞均有较好的抗肿瘤活性，具有良好的研究价值。 中分离出抗肿瘤环肽 Vitilevuamide (Cruz-Monserrate et al, 2003) ，从海绵(Phakellia costata) 中分离出抗肿瘤 1 环七肽Phakellistatins (Pettit et al, 1993) ，这些具有抗 1.1 肿瘤活性的天然产物是医学界开发新型抗肿瘤药物 的重要基础。目前，已经从多种海洋微生物的代谢产 1.1.1 菌株 中国水产科学院黄海水产研究所海 物中分离出具有开发价值的抗肿瘤化合物(Lebar et al, 洋产物资源与酶工程