以FeIII改性胶原纤维为载体固定过氧化氢酶-微生物学报.PDFVIP

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2011, July 25; 27(7): 1076−1081 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn ©2011 CJB, All rights reserved. 发酵工程与生化工程 以Fe(III) 改性胶原纤维为载体固定过氧化氢酶 1 2 1 1,2 陈爽 ，宋娜 ，廖学品 ，石碧 1 四川大学生物质化学与工程系，成都 610065 2 四川大学 制革清洁技术国家工程实验室，成都 610065 摘 要: 将胶原纤维用三价铁改性后作为载体，通过戊二醛的交联作用将过氧化氢酶固定在该载体上。制备的固定化 过氧化氢酶蛋白固载量为 16.7 mg/g，酶活收率为35 ％。研究了固定化酶与自由酶的最适pH 、最适温度、热稳定性、 贮存稳定性及操作稳定性。结果表明：过氧化氢酶经此法固定化后，最适pH 及最适温度与自由酶相同，分别为pH 7.0 和25 ℃；但固定化酶的热稳定性显著提高，在75 ℃保存 5 h 后，仍能保留30 ％的活力，而自由酶则完全失活；固定 化酶在室温下保存 12 d 后，酶活力仍保持在 88 ％以上，而自由酶在此条件下则完全失活；此外，固定化过氧化氢酶还 表现出了良好的操作稳定性，在室温下连续反应26 次后，相对活力为57 ％。该研究表明胶原纤维可作为固定化过氧化 氢酶的优良载体，并有望用于其他酶的固定。 关键词: 胶原纤维，载体，过氧化氢酶，固定化，酶活力 Immobilization of catalase on Fe (III) modified collagen fiber 1 2 1 1,2 Shuang Chen , Na Song , Xuepin Liao , and Bi Shi 1 Department of Biomass Chemistry and Engineering , Sichuan University, Chengdu 610065, China 2 National Engineering Laboratory for Clean Technology of Leather Manufacture, Sichuan University, Chengdu 610065, China Abstract: Fe (III) modified collagen fibers were used to immobilize catalase through the cross-linking of glutaraldehyde. The loading amount of catalase on the supporting matrix was 16.7 mg/g, and 35% enzymatic activity was remained. A series of experiments were conducted on free and immobilized catalase in order to investigate their optimal pH and temperature, and the thermal, storage and operation stability. Results suggest that the free and immobilized catalase prefer similar pH and temperature condition, which were pH 7.0 and 25 °C. It should be noted that the thermal stability of catal