毕赤酵母表达重组人白细胞介素11的纯化与鉴定.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( * # 年 月 $%%! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-. $%%! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 毕赤酵母表达重组人白细胞介素 的纯化与鉴定 !! ! $ $ $ $ ! 黄岩山 董 勇 李 辉 王同映 裘霁宛 余应年 ! （浙江大学医学院 杭州 #!%%%3 ） $ （杭州九源基因工程有限公司 杭州 #!%%!2） 摘 要 报道了毕赤酵母表达人白细胞介素 的下游工艺研究，并对其产物进行了分析鉴定。所用工艺流程为 !! 离心收集上清、超滤浓缩脱盐、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤。所得产物经 电泳、 分析、 @A@/BCD7 EB/FBGH + 端和 端序列分析、质谱、等电点分析和生物学活性分析，结果表明：产品纯度大于 ，结构和性质与 融合 H 4 I 3 * 0(,# 表达的+1;81J- 完全一致。 关键词 毕赤酵母，重组人白细胞介素 ，纯化，鉴定 !! 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） E432 C !%%%/#%3! $%%! %#/%$%/%K 人白细胞介素 （ ）是一种多功能的细胞 因在甲醇酵母中不能有效表达，因此我们根据甲醇 !! LMG/!! 因子，最基本的功能在于造血调控作用，它能刺激人 酵母的偏爱密码子，人工合成了缺失第一位BN( 的 的造血祖细胞和巨核细胞前体的分化并诱导巨核细 人MG/!! 全长基因，经克隆转化筛选得到NLMG/!! 的 胞的生成和成熟，最终导致血小板数量的增加。此 高表达工程菌OPMGK 。 外，它还具有促进消化道上皮损伤的恢复、调节脂肪 ! # 工程菌培养与上清收集 ［，］ 细胞分化等多种生物活性! $ 。5AC 于!44 年批准 设定发酵温度 ，利用全自动发酵罐（ #% Q R9(S-S 该产品上市，用于防止化疗引起的再生性血小板减 ， ）进行发酵。根据需要进行培养 H R * RN-;