柱前衍生化高效液相色谱法分析9种多糖中的单糖组成-济宁医学院学报.pdfVIP

济宁医学院学报２０１６年８月第３９卷第４期　ＪＪｉｎｉｎｇＭｅｄＵｎｉｖ，Ａｐｒｉｌ２０１６，Ｖｏｌ３９，Ｎｏ．４ ·２４１· ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００９７６０．２０１６．０４．００４ 柱前衍生化高效液相色谱法分析 ９种多糖中的单糖组成 王媛媛　张　晖　杨俊松　宗智慧 （蚌埠医学院公共课程部，蚌埠２３３０３０） 　　摘　要　目的　建立１苯基３甲基５吡唑啉酮（ＰＭＰ）柱前衍生化高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）对甘草多糖等 ９种多糖的单糖组成成分进行分析。方法　９种多糖样品水解后，利用ＰＭＰ试剂进行柱前衍生化并进行 ＨＰＬＣ 分析，采用ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳＳＰＣ１８色谱柱（２６０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ｍ），流动相为２０％乙腈与 ＫＨＰＯ三乙胺缓冲溶液 μ ２ ４ （ｐＨ＝６．９），流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２５４ｎｍ，进样体积１０ ｌ，柱温３０℃。结果　建立的方法对多种混合单糖 μ 标准品具有良好的分离效果，各单糖在相应的线性范围内线性关系良好，且方法的精密度、稳定性、重现性良好。 ９种多糖各由不同的单糖组成，且含量存在一定的差异。结论　该方法准确稳定，可以满足９种多糖的单糖组 成及含量分析。 关键词　柱前衍生化；高效液相色谱法；多糖；单糖组成 中图分类号：Ｏ６５７．７２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００９７６０（２０１６）０８２４１０４ Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｎｉｎｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｂｙｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＷＡＮＧＹｕａｎｙｕａｎ，ＺＨＡＮＧＨｕｉ，ＹＡＮＧＪｕｎｓｏｎｇ，ＺＯＮＧＺｈｉｈｕｉ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｕｂｌｉｃＣｏｕｒｓｅｓ，ＢｅｎｇｂｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇｂｕ２３３０３０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅｗｉｔｈ １ｐｈｅｎｙｌ３ｍｅｔｈｙｌ５ ｐｙｒａｚｏｌｏｎｅ（ＰＭＰ）ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｎｉｎｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｎｉｎｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗｅｒｅｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ， ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄｂｙＰＭＰａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｂｙＨＰＬＣｗｉｔｈｔｈｅＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳＳＰＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（２６０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ｍ）．Ｔｈｅ μ ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｔｈｅ２０％ ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅｂｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｗｉｔｈＫＨＰＯ（ｐＨ＝６．９），ａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１．０ ２ ４ ｍｌ／ｍｉｎ．ＴｈｅＵＶａｂｓｏｒｂａｎｃｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄａｔａｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２５４ｎｍ，ａｎｄｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ１０ｌｗｉｔｈ