动物胚胎工程yyd哺乳动物胚胎嵌合技术浅论.pdfVIP

第三篇 胚胎移植 分割与嵌合技术 第七章 哺乳动物胚胎嵌合技术 一、胚胎嵌合体 一、胚胎嵌合体 嵌合体（Chimera，也叫镶嵌体，Mosaic）是 由不同遗传组成的细胞或组织构建成的嵌合生 物体，嵌合体动物中那些基因型不同的细胞或 组织只是彼此接触，实际上它们是处在各自独 立的混合状态。 原发性嵌合体（primary chimera） 次生性嵌合体（sencondary chimera ） 二、胚胎嵌合体研究意义 二、胚胎嵌合体研究意义 1、发育生物学研究中的价值 1、发育生物学研究中的价值 胚胎细胞的命运和发育能力？决定发育的因子是什么？ 胚胎细胞的命运和发育能力？决定发育的因子是什么？ 分化能否逆转？基因表达是如何调控的？发育时细胞之 分化能否逆转？基因表达是如何调控的？发育时细胞之 间是以什么样的关系发生互相作用并参与发育的？ 间是以什么样的关系发生互相作用并参与发育的？ 2、动物模型构建； 2、动物模型构建； 3、畜牧生产； 3、畜牧生产； 二、胚胎嵌合体发展概况 二、胚胎嵌合体发展概况 1901，Spemann， 两栖类开展研究； 1901，Spemann， 两栖类开展研究； 1942，Nicholas 和Hall，大鼠； 1942，Nicholas 和Hall，大鼠； 1965，Mints，嵌合体小鼠，成活至成年； 1965，Mints，嵌合体小鼠，成活至成年； 1968，Gardner，囊胚注射法嵌合小鼠； 1968，Gardner，囊胚注射法嵌合小鼠； 20世纪70年代，大鼠、兔、羊嵌合体； 20世纪70年代，大鼠、兔、羊嵌合体； 20世纪80年代，牛、猪嵌合体；小鼠/大鼠 20世纪80年代，牛、猪嵌合体；小鼠/大鼠 种间、绵羊/山羊以及马/斑马属间嵌合体； 种间、绵羊/山羊以及马/斑马属间嵌合体； 三、嵌合体的制作原理与制作方法 三、嵌合体的制作原理与制作方法 细胞识别与粘着 细胞识别与粘着 一个细胞对另一个细胞的认识和鉴别，称为细胞识别 一个细胞对另一个细胞的认识和鉴别，称为细胞识别 （cell recognition ）。 （cell recognition ）。 发育中的细胞具有选择性的与其它细胞相亲和的现 发育中的细胞具有选择性的与其它细胞相亲和的现 象，这种现象称为细胞粘着（cell adhension ）。 象，这种现象称为细胞粘着（cell adhension ）。 细胞识别与粘着的分子基础 细胞识别与粘着的分子基础 细胞表面粘着分子（cell adhesion molecule， 细胞表面粘着分子（cell adhesion molecule， CAM)；钙粘素（cadherin ）；整合素 CAM)；钙粘素（cadherin ）；整合素 （integrin）； （integrin）； 三、嵌合体的制作原理与制作方法 三、嵌合体的制作原理与制作方法 聚合法（Aggregation) 聚合法（Aggregation) 1、将两个或两个以上去除透明带的早期胚胎聚合在一 1、将两个或两个以上去除透明带的早期胚胎聚合在一 起培养，最终形成一个嵌合体胚胎的过程； 起培养，最终形成一个嵌合体胚胎的过程； A 采集胚胎 A 采集胚胎 B 去除透明带 B 去除透明带 C 聚合 C 聚合 D 聚合胚胎培养及移植 D 聚合胚胎培养及移植 2、常见聚合类型 2、常见聚合类型 A 胚胎与胚胎聚合 A 胚胎与胚胎聚合 B 卵裂球或细胞与胚胎聚合 B 卵裂球或细胞与胚胎聚合 C 两组细胞间聚合 C 两组细胞间聚合 三、嵌合体的制作原理与制作方法 三、嵌合体的制作原理与制作方法 三、嵌合体的制作原理与制作方法 三、嵌合体的制作原理与制作方法 注射法 注射法 1、通过显微操作将一些细胞注入到发育胚胎的卵周隙 1、通过显微操作将一些细胞注入到发育胚胎的卵周隙 或者囊胚腔内以制备嵌合体的方法。 或者囊胚腔内以制备嵌合体的方法。 2、注射法的常见形式 2、注射法的常见形式 A 8细胞-桑椹胚卵周隙注入法