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黑曲霉液体深层发酵产纤维二糖酶的研究 赵海峰夏黎明 浙江大学化学工程和生物工程学系，浙江杭州310027 摘要：纤维二糖酶(cellobiase)是纤维素酶系中的重要组分之一，目前由里氏木霉(Trichodermareesei)生产的纤维素酶制剂中纤维 二糖酶的活力明显偏低，限制了纤维素的糖化效率。本文采用一个黑曲霉菌株 （AspergillusnigerZU-04），在液态发酵条件下生产纤 维二糖酶，对主要的发酵工艺参数进行了研究，结果表明，培养基中添加1.0％的麸皮对纤维二糖酶的形成有明显的促进作用；葡萄 糖、玉米浆粉的适宜浓度分别为2.0％、0.3％；变温培养缩短了产酶周期，培养4d，酶活力达到最高，为6.23IU/mL。采用黑曲霉纤维二糖 酶与里氏木霉纤维素酶协同水解酸预处理后的玉米芯，当纤维素酶用量为20IU/g底物时，纤维二糖酶活力和滤纸酶活力比例为0.43, 2d酶解得率达到91.1％。 黑曲霉；液体深层发酵；纤维二糖酶；协同水解 TQ920.6 A 0254-5071(2012)04-0036-04 CellobiaseproductionbyAspergillusnigerundersubmergedfermentation ZHAOHaifengXIALiming 2011-12-24 国家自然科学基金 赵海峰(1986-)，男，山东潍坊人，在读硕士研究生，主要从事生物化工方面的研究工作 @@[2]KUMARD,BHALLATC.Microbialproteaseinpeptidesynthesisap 究[J].食品与发酵工业，2005，31(4)：29-32. proachesandapplications[J].ApplMicrobiolBiotechnol,2005,68(1): @@[8]吴根福，杨志坚.发酵工程实验指导[M].北京：高等教育出版社，2006: 726-736. 26-28. @@[3]RAOMB,TANKASLEAM,MOHINISG,etal.Molecularand @@[9]伍欣，张晓晃，武龙，等.产碱性蛋白酶嗜碱芽孢杆菌的筛选及其 Biotechnoiogicalaspectsofmicrobialprotease[J].MicrobiolMolBid 研究[J].微生物学杂志，2005,25(2):40-44. R,1998,62(3):597-635. @@[10]RE.布坎南，N.E.吉本斯.伯杰细菌鉴定手册[M].北京：科学技术出 `@@[4]方海红，胡好远，黄红英，等.微生物碱性蛋白酶的研究进展[J].微生 版社，1984. 物学通报，2002，29(2)：57-59. @@[11]王朋朋，常娟，王平，等.蛋白酶和淀粉酶产生菌的筛选及酶学 @@[5]胡承.地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶的研究[J].工业微生物，1999，12 性质分析研究[J].中国畜牧杂志，2009，45(21):48-51. (4)：29. @@[12]沈玉洁，张明春，向苇，等.高产酸性蛋白酶菌株的筛选及发酵条 @@[6]钱存柔，黄仪秀.微生物学实验教程[M].第1版.北京：北京大学出版 件研究[J].食品与发酵科技，2010,46(6):32-35. 社,1999. @@[13]于宏伟，栗志丹，郝珊珊，等.蛋白酶产生菌的筛选及酶学性质研究 @@[7]李宏，刘成君，王兰，等.高温碱性蛋白酶菌株的选育及酶性质研 [J].农产品加工 ·学刊,2006(10)：67-70. 过多的 不利于 酶制剂 维二糖