检验技术操作程序课件.ppt

操作程序 实验原理 10%～20%的非淋菌性尿道炎由解脲支原体引起。解脲支原体含有多种酶，尿素酶活性是其特有的性质。 梅毒操作程序梅毒快速血浆反应素诊断（RPR） 操作程序 实验原理 梅毒患者血清中存在着能与VDRL抗原发生凝集反应的反应素，此试剂利用这一原理，将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒表面，当待测血清中存在反应素时，即与其发生凝集反应，出现肉眼可见的黑色凝块。阳性者，将血清稀释作定量试验。 采取标本 无菌采取静脉血2ml 实验操作 1、分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 2、将待检血清50微升用生理盐水作倍比稀释（原血清、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32…），均匀铺加在纸卡的另外的圆中。 3、用盒中的专用针头、滴管吸取RPR试剂，分别垂直滴加1滴于上述血清中。 4、用RPR旋转仪或多功能振荡仪水平转动纸卡8分钟，100转/分钟，然后3分钟内在光线充足处判断结果。 结果判断 1、阴性反应（—）：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。 2、弱阳性反应（+～++）：可见较小的黑色凝集物。 3、阳性反应（+++～++++）：可见中等或较大的黑色凝块，溶液清亮。 注意事项 1、RPR试剂在使用前应充分摇匀。 2、血清中加入试剂后充分振荡使其混匀。 3、定性试验呈弱阳性或阳性者必须做定量试验才能了解患者血清中的抗体滴度，然后对每个稀释度的血清再进行测定并判断结果。 4、定性试验呈弱阳性或阳性反应者，需结合临床进行综合分析判断，同时再做特异性密螺旋体试验加以确诊。因为此试验是梅毒非特异性反应素试验，麻风等患者可出现生物学假阳性反应。 5、试剂盒中的专用滴管、针头只能用来吸取RPR试剂，不能用来吸取血清或作他用。 梅毒螺旋体抗体诊断凝集试验 （TPPA） 操作程序 实验原理 TPPA是将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应，由此可以检测出血清和血浆中的梅毒螺旋体抗体，并且可用来测定抗体效价 谢谢！！！ 静脉采血 取25ul血清做倍比稀释 每孔加25ul致敏因子 混匀后置室温2小时后观察结果 阴 性 阳 性 报告结果 报告结果 * * 检验技术操作程序zrf 支原体培养操作程序 宫颈、尿道分泌物 接种培养基 37℃24-48小时培养 阴性（黄色） 阳性（红色） 报告结果 报告结果 培养与鉴定是确定支原体最可靠的方法。在含指示剂系统的肉汤培养基中进行培养可显示支原体的代谢活性。人型支原体经一系列的反应可使精氨酸代谢产生氨，pH值升高，指示剂由黄色变为粉红色。解脲支原体产生尿素酶，后者可将尿素分解成氨，也可以使指示剂由黄色变为粉红色。若有生殖支原体生长，则分解葡萄糖，产生丙酮酸和乳酸，pH值下降，液体颜色由红变黄，且无明显混浊。 该方法简便、有效、价格低廉且有特异性。目前已广泛用于支原体感染的临床检测 采取标本 男性需用无菌细小棉拭缓慢插入尿道2-4cm处，轻轻捻转取柱状上皮细胞标本。女性需用阴道窥器扩张后先用棉拭拭去宫颈口的分泌物，再用另一棉拭插入宫颈1-2cm处捻转10-30秒，取柱状上皮细胞 实验操作 然后放入培养基中，充分振洗后将棉拭子弃去，旋紧瓶盖，置37℃孵箱中培养24-48小时。 男性除用尿道拭子外，可取前列腺液、精液或中段尿；女性除用宫颈拭子外，可采用羊水、但不推荐尿液。加样量均为0.2ml，培养方法同上。 结果判断 解脲、人型支原体培养24小时后观察，培养基变红为阳性，若培养至72小时，培养基仍未变红，可判为阴性。生殖道支原体培养4～7天观察，培养基由红色变成黄色阳性，反之为阴性。 注意事项 1、接种标本时，三种培养基不能混合使用（即不能用接种了解脲支原体的棉拭子去接种人型支原体或生殖道支原体，反之亦然）。 2、支原体生长时，培养基一般无明显混浊，如有小颗粒沉淀或粘于管壁，亦属正常。 3、如为Mh-Uu培养基，24小时变红者可能为Uu支原体感染，48小时以后变红者可能为Mh支原体感染。 4、阳性结果的支原体标本可保存在冰箱中。 支原体药敏试验 药敏抗生素全部采用临床常规治疗用抗生素，药敏分别为：四环素（TET） 螺旋霉素（ACE） 红 霉 素（ERY）