ECM及Matrigel使用手册.pdf

BD Bioscience Discovery Labware BD BiocoatTM 产品使用指南 BD BiocoatTM MatrigelTM 基质 BD BiocoatTM 细胞相关检测系统 BD BiocoatTM - MatrigelTM 使用指南 目 录 1 BD BiocoatTM MatrigelTM 基质 1.1 Matrigel 基底膜基质胶 1 1.2 高浓度HC Matrigel 基底膜基质胶 3 1.3 人来源细胞外基质 4 1.4 Ⅲ型人重组胶原蛋白 5 1.5 高浓度层粘连蛋白/巢蛋白混合物 6 1.6 人胚胎干细胞专用的Matrigel 基质 7 2 BD BiocoatTM 细胞检测相关系统 2.1 Biocoat 肿瘤侵袭系统 8 2.2 Biocoat 血管生成系统：内皮细胞侵袭 10 2.3 Biocoat 血管生成系统：内皮细胞迁移 12 2.4 Biocoat 血管生成系统：内皮血管形成 14 2.5 Biocoat HTS Caco-2 检测系统 15 附录：细胞培养系统快速使用指南 17 BiocoatTM MatrigelTM 常见问题 17 BD BiocoatTM - MatrigelTM 使用指南 BD BiocoatTM - MatrigelTM 使用指南 1 BD BiocoatTM MatrigelTM 基质 1.1 Matrigel基底膜基质胶 BD 产品货号：354230 354234 356230 356231 356234 356235 356237 储存和运输：-20 度储存，干冰运输。 操作指南 BD 采用专利技术，从富含胞外基质蛋白的EHS 小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基底膜基 质，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等组成，还包含生长因子 和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel 基底膜基质在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维 基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化， 以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。 BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli 细胞、黑 色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel 还能影 响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。高浓度的 Matrigel 适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。 产品特性 Matrigel 基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2 作用引起的， 但是与 5 ％CO2 平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使 Matrigel 分散均匀。所有操 作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70 ％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器 以保证Matrigel 呈匀浆状。 细胞可在0.5mm 厚度的Matrigel 基质层表面生长，也可在 1mm 厚度的Matrigel 三维基质 内生长。过度稀释的Matrigel 会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的 分化研究。 注意：可将冻融后的Matrigel 分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保 存，避免多次冻融。 Matrigel 在22-35 ℃温度环境下快速成胶，因此溶解时在4 ℃冰上过夜冻融（4 度时会随着 温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操 作Matrigel 。成胶后的Matrigel 可以在4 ℃24 －48 小时后重新呈液态。 推荐包被与成胶方法 注意