Mabselect 有中间清洗步骤 去除HCP.pdfVIP

GE Healthcare 使用向导 I 工艺开发 MabSelect SuRe™： 单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门 介绍 在单克隆抗体纯化中，为了获得所需高质量 MabSelectTM SuRe 是一种 Protein A 层析介 的抗体，一般使用两步或三步层析步骤。通 质 ，耐受苛刻和具有成本效益的 CIP 程序， 常，用于三步工艺的层析介质为 Protein A 即 0.1-0.5 M NaOH。 →阳离子交换→阴离子交换 ；用于两步工艺 的层析介质为 Protein A→Capto adhere （多 用于工艺开发的推荐途径是使用高通量工 模式离子交换 ）。所有的单克隆抗体（Mabs） 艺开发(HTPD)--使用 PreDictor™ 96 孔板可以 都有一些相似的特性，所以可以使用同一个 在短时间内评估大量的层析参数 （参考文献 平台方法纯化 。请注意，平台并不意味着相 1）。然后最佳工艺参数被放大，即 HTPD→ 同的工艺，它只是表示工艺的某些方面不需 实验室规模→中试车间→生产。这种方法提 要从头开始开发，因为可以利用以前单克隆 供了大量的对于 Quality by Design (QbD) 抗体工艺开发经验。 方法尤其有用的数据。甚至当使用 HTPD 时， 下一个表格中的一些信息可以作为起点使 本次讨论的目的是提出一种纯化工艺，它可 用。 以用于哺乳动物细胞生产的大多数 Mabs 的 纯 化 工 艺 。 这 里 我 们 介 绍 一 种 基 于 TM MabSelect SuRe 层析介质做工艺开发的一 般起始建议 （未优化）。 1 使用向导 I 系统 控制 层析介质 层析柱 床高度(cm) CV(ml) ™ ÄKTA™ avant 25或150 UNICORN 6 MabSelect SuRe Tricorn™ 10/200 20 15.71* 用于 MabSelect SuRe 捕获步骤的层析方法 保留时间 ，分钟 步骤 体积或时间 缓冲液组成 （线性流速，cm/hr） 0.仅在保存后-平衡 3 CV 20 mM 磷酸钠, 0.15M NaCl, pH 7.4 7.5 (160 cm/hr) 1.平衡 0.25 CV 20 mM 磷酸钠, 0.15M NaCl, pH 7.4 3.4 (350 cm/hr) 2.4-4.8 (500-250 cm/hr) 5%穿 透 时 80% 2.上样 按需要 长保留时间 的动态载量 → 高结合容量 3.清洗 3 CV 20 mM 磷酸钠, 0.15M NaCl, pH 7.4 2.4-4.8 (500-250 cm/hr)