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吸附剂效率测试方法 2013-12-20
毒素吸附劑之效率測試方法 台灣朝陽科技大學 毒素吸附測試方法 (AFL-B2, AFL-G2, ZEA and DON) • 標準溶液 : 1. 玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA) 與 嘔吐毒素(deoxynivalenol, DON) 的標準溶液 是以標準品加入甲醇配製成500 ppm. 2. 黃曲毒素(aflatoxin, AFL B2 or G2) 的標準溶液是以標 準品加入甲醇配製成3 ppm. 3. 毒素測試溶液(AFLs: 30 ppb, ZEA: 300 ppb, DON: 300 ppb) 是將標準溶液加入 磷酸鹽緩衝液(PBS, pH 3) 配製完成的. Amlan International Confidential 2 10X 磷酸鹽緩衝液 (Phosphate Buffered Saline, PBS, pH 3) 2 g KCl 2 g KH2PO4 29.2 g Na2HPO4 • 12H2O 80 g NaCl 將上述藥劑加入900 mL 純水中. 以1.5 N HCl 調整至pH3. 而後加純水至1000 mL. Amlan International Confidential 3 ZEA, DON 測試溶液之配製方法 500 ppm ZEA 10X PBS, 純水 總量 or DON pH 3 54 L 9 mL 81 mL 90 mL AFLs測試溶液之配製方法 3ppm 3ppm 10X PBS, 純水 總量 AFL B2 AFL G2 pH 3 200 L 200 L 9 mL 80.6 mL 90 mL Amlan International Confidential 4 吸附劑除水方法: 1. 吸附劑事先以200 oC加熱 16 小時, 取出後在 乾燥箱裡回至室溫 2. 將1.5 mL 微離心管(micro-centrifuge tube) 放 在天平上 3. 將乾燥後之吸附劑精確秤至微離心管內 (10, 30 and 60 mg For AFLs and ZEA) (30, 60 and 90 mg for DON) Amlan International Confidential 5 吸附劑與毒素測試溶液之混合: 1. 取20 mL 毒素測試溶液至100 mL 三角瓶 (erlenmeyer flask) 內, 加入吸附劑混合 o 2. 將上述混合液在搖瓶器(incubator) 中以37 C, 200 rpm 搖瓶 1 小時 3. 取1.5 mL 混合液至1.5 mL 微離心管, 以14000 rpm 離心5 分鐘, 然後以過濾飛碟(filtration disc) 過濾 (AFLs and DON 過濾, 但是ZEA 不過濾) 4. 取1 mL 離心過濾液至1.5 mL 微離心管內 Amlan International Confidential 6 高效液相層析儀附螢光偵測儀量測毒素濃度 (High-Performance Liquid Chromatography c
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