响应面法优化Alcaligenessp产脂肽生物破乳剂培养基的研究.PDFVIP

　第 38 卷 第 5 期 工 业 微 生 物 　Vol . 38 No . 5 　 　2008 年 10 月 Industrial Microbiology Oct . 2008 响应面法优化 A lcaligenes sp . 产脂肽生物破乳剂培养基的研究 刘 　佳 , 　黄翔峰 , 　陆丽君 , 　闻　岳 , 　杨殿海 , 　周 　琪 ( 同济大学环境科学与工程学院 ,污染控制与资源化研究国家重点实验室 ,上海 200092) 摘 　要 　　生物破乳剂是应用于石油开采业中的新型破乳剂之一 ,本研究对筛选得到的一株破乳剂产 ( ) 生菌 鉴定为 A lcaligenes sp . 产生的脂肽类生物破乳剂进行了发酵培养基的优化 ,采用 SAS 软件的响应 面回归方法对培养基中主要因素进行了研究,试验结果表明,在碳源石蜡为 4. 76 % 、氮源牛肉膏为 0. 12 % 、磷源 K HPO 　KH PO 为 0. 530. 8 %时,破乳剂的产生量为最大 ,比优化前提高了近一倍 。 2 4 2 4 关键词 : 生物破乳剂 ; 　脂肽 ; 　产碱杆菌 ; 　响应面 　　生物表面活性剂是由微生物代谢作用产生的具 XJT1 ,经 V I TE K2 comp act 系统鉴定 、16 S rDNA 有亲水基、亲油基的表面活性物质 。生物破乳剂是生 同源性分析及生理生化试验鉴定 ,确定为产碱杆菌 ( ) [ 11 , 12 ] 物表面活性剂的一种 ,对原油乳状液具有破乳作用 , 属 A lcal igenes sp . , 研究发现该菌的破乳效 因此在石油开采业 中具有特殊 的应用价值和意 果优于化学破乳剂 ,且具有石油降解能力 ,鉴定及其 义[ 1 ,2 ] 。由于生物破乳剂具有化学法难以合成的基 性质研究见文献[ 13 ] 。具体筛选过程 、发酵培养基 团、无毒易降解 、用量少效率高等特点 , 目前生物破乳 及培养条件见文献[ 14 ] 。 剂的开发与研究已是石油开采业中的研究热点之 1. 2 　响应面法优化培养基组成 一[3 ,4 ,5 ] ,而生物破乳剂的培养基优化是降低生物破乳 1. 2 . 1 　PluckettBurman 二水平实验设计 剂的成本的重要途径 , 目前采用较多的方法有响应面 　　采用单因素试验对 XJT1 的发酵培养基分别 [6 ,7 ,8 ] ( 对碳源 、氮源 、磷源等组分进行筛选和水平优化研 法、正交试验法、均匀设计法 。响应面法 Re sponse surface methodology , RSM) 是一种优化过程的 究 ,以对 XJT1 全培养液活性高和生物量大为依 综合技术 ,采用该法可以建立连续变量曲面模型和回 据 ,筛选确定了 8 个因素和其对应的最优水平 。石 归方程 ,可同时对影响因变量的各因子水平及其交互 蜡 、N aN O 、牛 肉膏、K HPO KH PO 、MgSO 、微