基因转染增强剂-天恩泽.PDF

列 系 沙 净 天 CAT#: 140621-0.5 常温运输，4℃保存 基因转染增强剂 Polybrene (Hexadimethrine Bromide) 使用手册V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 Polybrene (hexadimethrine bromide) （聚凝胺）又名为溴化己二甲铵、 海美溴铵，CAS 号：28728-55-4。聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺 乳动物细胞的DNA 转染实验以增强转染效率。Polybrene 增强转染效率原理图 如下： 本产品具有如下特点： 1. Polybrene 广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒 介导的基因转染等实验，可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的 转染效率。 2. Polybrene 对某些细胞（如末端分化的神经元，DC 细胞）毒性较大，初次 应用建议先做毒性测试。 3. Polybrene 还是一种有效的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性 凝集的红细胞；还可用于蛋白测序，小剂量的 Polybrene 在自动测序分析 可明显改善多肽的降解现象；PVDF 膜上加入 Polybrene 能提高膜的亲和 性 规格及成分 成分 编号 0.5 mL 包装 Polybrene ，10mg/mL 140621 0.5 mL 使用手册 1 份 运输及保存 低温运输，4℃保存，有效期一年。 自备试剂 样品等 使用方法 慢病毒感染举例： 1. 第一天按实验需要将细胞铺板（比如24 孔板）。细胞数以第2 天密度约50% 为宜。37℃ 培养过夜。 2. 第二天感染前，从-80℃冰箱取出病毒，冰浴融化，参考相关文献或者根据 预实验得到的 MOI 值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。注意：轻 轻混匀，不要使用振荡器。 3. 吸去细胞原有培养基，将按照MOI 稀释好的病毒液+培养基+ Polybrene （对 于293 细胞，终浓度6 μg/mL）加入细胞中，轻轻摇匀。37℃培养过夜。 注：病毒液-培养基- Polybrene 混合液，按如下操作制备混合液： ①添加完全培养基（60mm 培养皿2 mL，100mm 培养皿3 mL），37℃ 预热；②加入病毒轻轻混匀；③加入Polybrene 至终浓度为2μg- 12μg/mL。 轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI 高于20 时，建议客户添 加Polybrene （终浓度2~12μg/mL ，浓度因不同的细胞而异，具体的请参 考相关文献）来提高病毒的感染效率。如果感染目的细胞是 Jurkat ， kasumi ，NB4 ，H929 ，GBC-SD，MCF-7 等，建议不要添加Polybrene ； 大部分原代细胞感染也不需要添加