HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B含量.docVIP

HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B含量 　【摘要】 用HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B的含量。方法 采用Kromasil100-5 C18柱（250mm×4.6mm, 5μm），以乙腈-甲醇-1％甲酸溶液（10：30：60）为流动相，检测波长为286nm。结果 丹酚酸B在0.08～1.64μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为97.9%,RSD为2.0%（n=6）。结论 本法简便、快速，结果准确可靠。 【关键词】 高效液相色谱法 冠心丹参胶囊 丹酚酸B 【Abstract】 Objective To establish a method for the determination of salvianolic acid B in Guanxindanshen capsules by HPLC.Methods Kromasil100-5 C18 column （250×4.6mm,5um） was used with a mobile phase of acetonitrile-methanol-1%formic acid solution （10:30:60）. The flow rate was 1.0 ml.min-1 and the detection wavelength was 286nm.Results There was good linearity in the range of 0.08-1.64μg （r=0.9999）. The average recovery was 97.9% with RSD2.0%（n=6）.Conclusion The method is simple, accurate ,reproducible and can be used to control the quality of the preparation. 【Key words】 HPLC; Guanxindanshen capsules; salvianolic acid B 冠心丹参胶囊是由丹参、三七、降香油三味中药组成的复方制剂，具有活血化瘀、理气止痛之功效，用于气滞血瘀所致的胸闷、胸痹、心悸气短；冠心病见上述症候者。丹参为方中君药，其主要水溶性有效成分丹酚酸B具有抗心绞痛、增加冠脉血流量及抗血小板凝集作用。而此药品质量标准中未对该成分进行质量控制。本实验采用HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B的含量，可用于冠心丹参胶囊的质量控制。 1 仪器与试药 1.1 仪器 LC-10ATVP高效液相色谱仪（日本岛津）。华南HN-1006型超声清洗仪（广州华南超声设备厂）。BP211D电子天平（德国赛多利斯）。 1.2 试剂 乙腈为色谱纯；乙醇、甲酸均为分析纯；水为Millipore 去离子水。对照品：丹酚酸B（批号：111562 -200302，中国药品生物制品检定所）。冠心丹参胶囊（国药控股深圳中药有限公司出品，批号：070302、070401、070501）。 　　2 色谱条件 　　色谱柱：Kromasil100-5 C18柱（250mm×4.6mm, 5μm）。流动相：乙腈-甲醇-1％甲酸溶液（10：30：60）。检测波长：286nm。柱温：30℃。流速：1.0ml/min。外标法定量。 　　3 线性关系标准 　　溶液制备：精密称取丹酚酸B对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含丹酚酸B 0.08mg、0.24mg、0.4mg、0.8mg、1.2mg、1.6mg的溶液；分别进样10μl，记录峰面积，取峰面积及进样量进行线性回归。结果见表1、图1。表1 丹酚酸B校正曲线计算表图1 丹酚酸B校正曲线 结果表明：丹酚酸B的进样量在0.08 ~1.64μg范围内与峰面积线性关系良好。 　　4 供试品 　　测定供试品溶液的制备：取本品适量，研细，取约0.2g，精密称定，置20ml量瓶中，加75％乙醇近刻度，超声（300W,45kHz）处理15min，放冷，加75％乙醇至刻度，摇匀，静置，滤过，取续滤液，用微孔滤膜滤过，即得。测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。测得3批样品含量结果见表2。表2 冠心丹参胶囊中丹酚酸B含量测定结果所测3批冠心丹参胶囊样品，丹酚酸B的含量在6.59~8.56mg/g之间。 　　　5 精密度试验 　　重复性试验：取供试品（批号070501）6份，按“供试品溶液的制备”方法制备样品溶液，依法测定，结果见表3。表3 重复性试验结果实验表明：方法的重复性良好，适合含量测定的要求。 　　6 加样回收率试验 　　取冠心丹参胶囊样品（批号070501，含量0.651mg/g）6份，每份约0.1g，精密称定，依次分别每组添加丹酚酸B对照品溶液（