豇豆子叶节再生体系建立及pti4基因的遗传转化-热带亚热带植物学报.pdfVIP

热带亚热带植物学报　2015 ，23(5) ：534 ~ 542 Journal of Tropical and Subtropical Botany 豇豆子叶节再生体系建立及Pti4基因的遗传转化 1a 1a 1b 1b 2 1a* 姜建业 , 谢永东 , 王一鸣 , 赵丽 , 铁曼曼, 唐懿 (1. 四川农业大学, a. 果蔬研究所； b. 园艺学院, 成都 611130； 2. 达州市农业科学研究所，四川 达州 635000) 摘要： 为获得豇豆(Vigna unguiculata)遗传转化体系 ，以 ‘成豇七号 ’带 1 片子 叶的子 叶节作为外植体 ，对其高效再生体系和农 杆菌介导抗病基 因 Pti4 的遗传转化进行 了研究 。结果表 明，豇豆无菌苗、不定芽诱导和不定芽伸长培养 的最适培养基分别为 MSB5 + 6-BA 3.0 mg L– 1、MSB5 + 6-BA 1.0 mg L– 1 + KT 0.06 mg L– 1 和 MSB5 + 6-BA 0.5 mg L– 1 + IBA 0.2 mg L– 1。不定芽在 MS 培养基上能迅速诱导生根 ，获得完整植株 。以豇豆子叶节为受体 ，通过农杆菌介导成功将 Pti4 整合到 ‘成豇七号 ’抗性芽基 因组 中。因此 ，豇豆高效再生体系的建立为遗传育种研究奠定 了基础 。 关键词： 豇豆 ；子叶节 ；组织培养 ；抗病转录因子 ； ；农杆菌介导 Pti4 doi: 10.11926/j .issn.1005–3395.2015.05.008 Establishment of Regeneration System of Cotyledon Node and Genetic Transformation of Pti4 Gene to Cowpea 1a 1a 1b 1b 2 1a* JIANG Jian-ye , XIE Yong-dong , WANG Yi-ming , ZHAO Li , TIE Man-man , TANG Yi (1a. Institute of Pomology Olericulture; 1b. College of Horticulture, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China; 2. Institute of Agricultural Science Research of Dazhou, Dazhou 635000, Sichuan, China) Abstract: In order to obtain genetic transformation system of cowpea ( Vigna unguiculata), its cotyledon nodes with one cotyledon of ‘Chengjiang 7’ was used as explants, the regeneration system and Pti4 genetic transformation system by Agrobacterium -medium were studied. The results showed that the optimum mediums for aseptic seedling, adventitious bud introduction and adventitious bud elongation were MSB5 + 6-BA 3.0 mg L–1 , MSB + 6-BA 1.0 mg L–1 + KT 0.06 mg L–1 and MSB + 6-BA 0.5 mg L–1 + IBA 0.2 mg L–1 , respectively. 5 5 Adventitious buds could rapidly rooting on MS m