利用组织工程技术再生软骨组织实验探究.docVIP

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利用组织工程技术再生软骨组织实验探究

利用组织工程技术再生软骨组织实验探究  关键词:细胞;软骨;再生;组织工程   【摘要】 目的 在有免疫力的动物体兔体内探索组织工程化软骨生成的影响因素。 方法 经不同物质修饰的聚羟基乙酸支架与软骨细胞体外培养,观察基质产生情况,并将细胞支架复合物体内回植,观察软骨的生成,并进行组织学及超微结构评价。 结果 以卵磷脂、多聚赖氨酸及聚乳酸共同修饰的聚羟基乙酸与软骨细胞体外培养,结果基质产生旺盛,体内回植后软骨生成良好。 结论 细胞支架复合物体外培养期间有基质产生,是组织工程化软骨生成的前提条件;以卵磷脂、多聚赖氨酸及聚乳酸共同修饰的聚羟基乙酸支架与软骨细胞复合培养后回植到有免疫力的动物体内可生成组织工程化软骨。   TheexperimentalstudyofmorphogenesisofcartilagetissuesbymeansoftissueengineeringtechniquesLIUYanchun,WANGWei,CAOYilin,etal.DepartmentofPlasticSurgery,ShanghaiNinthPeoplesHospital,AffiliatedtoShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai,200011   【Abstract】ObjectiveTofindthefactorsaffectingthemorphogenesisoftissue-engineeredcartilageinanimalswhohaveinherentimmunity.MethodsToculturechondrocytesseededontopolyglycolicacid(PGA)scaffoldscoatingwithdifferentmaterials,observetheproductionofmatricessecretedbychondrocytesandimplanttheconstructsofchondrocytesandscaffoldsintosubcutaneousofrabbits.Theformationofcartilagewereevaluatedusinghistologyandelectronmicroscope.ResultsThechondrocytesproducedmorematriceswhenseededontoPGAscaffoldscoatingwithPLA,LECandPLYS.Theformationofcartilagewasexcellentwhentheconstructsabovewereimplantedintothesubcutaneousofrabbits.ConclusionThemoreproductionofmatrices,thebetterformationoftissue-engineeredcartiolage;TheconstructsofchondrocytesseededontoPGAcoatingwithPLA,LECandPLYScanformtissue-engineerdcartilageinanimalswhohaveinheritedimmunity.   【KeyWords】CellsCartilageRegenerationTissue-engineered   目前有关组织工程化软骨的研究大部分是在无免疫力的裸鼠体内进行[1]。在有免疫力的动物体内形成组织工程化软骨的研究报道较少,而且目前所用固体细胞培养支架主要是以聚乳酸修饰的聚羟基乙酸,存在着亲水性差,对细胞吸附力弱等缺点[2]。本课题通过不同物质修饰的聚羟基乙酸与软骨细胞体外培养后回植,探讨在有免疫力的动物兔体内组织工程化软骨形成的影响因素,为软骨组织工程技术过渡到临床应用提供理论依据。   材料与方法   一、聚羟基乙酸支架的表面修饰   将直径15μm纤维间隔150~200μm厚度100μm的聚羟基乙酸(Polyglycolic acid,简写PGA)无纺网(DAVIS-GECK公司提供)以2%的聚乳酸(Polyglycolic acid,简写PLA)二氯甲烷溶液包埋固定再分别以1%的卵磷脂(Lecithin,简写LEC)无水乙醇溶液及10%多聚赖氨酸(Poly-1-lysine,简写PLYS)包埋,得到四种经不同物质修饰的聚羟基乙酸支架;(1)PGA加PLA;(2)PGA加PLA加LEC;(3)PGA加PLA加PLYS;(4)PGA加PLA加LEC加PLYS。支架消毒采用75%酒精浸泡及紫外线照射。   二、软骨细胞悬液制备[3]   取新西兰大白兔一侧耳廓软骨(兔体重2.0~2.

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