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几种水溶性维生素对小鼠淋巴细胞活性作用 　 作者：孙明洁，高 燕，王 珂，赵 冬 【摘要】 目的 探索研究水溶性维生素（维生素B1、维生素B6、维生素B12和维生素C）对体外小鼠淋巴细胞活化的作用。方法 采用改良的MTT法，来检测体外小鼠淋巴细胞活性。结果 VitB1 100μl(含0.005μg)、VitB6（12.5μl含0.000625μg）对体外小鼠淋巴细胞活性是明显的，VitC 25μl(含0.01μg)作用也是明显的。VitB１２则随浓度增高作用稍有增强，但差异无显著性。结论 结果显示VitB1、VitB6和VitC对小鼠淋巴细胞活性有增强作用。 【关键词】 水溶性维生素；MTT法；小鼠淋巴细胞 【Abstract】 Objective We proposed to study the effecte of water solule Vitamins(Vitamin B1、Vitamin6、Vitamin12 and Vitamin C)in vitro mice lymphocytes.Methods We took the modified method of MTT to explose the activation or in vitro mice lymphocytes.Results VitB1 100μl(contain 0.005μg)、VitB6（12.5μl contain 0.000625μg）、stimualated the effect of in vitro mice lymphocytes which was obvious and VitaminC（25μl contain 0.01μg)） was manifested too.Conclusion Water solule Vitamins (VitB1、VitB6、VitB12 and VitC)were able to stimulate the ativation of in vitro mice lymphocytes under cerftain concentration. 【Key words】 water sobale vitamin； MTT method； mice lymphocytes 水溶性维生素包括B族维生素和维生素C，是维持人体正常生理机能和物质的能量代谢所必需的物质。当前许多国内外学者研究它们抗衰老、抗氧化和对胸腺的作用，企图阐明它们对机体免疫功能的作用。许多学者都涉及它们提高机体免疫力，但未见报道它们直接对淋巴细胞的作用。本文选用和人类基因组具有大量同源性小鼠的淋巴细胞，体外实验检测维生素B1、B6、B12和维生素C对小鼠血中淋巴细胞活性的作用。 Mosman(1983)［１］报道噻唑蓝（MTT）比色法，经后人改良，使这种方法更加完善，成为定量、重复性好、简便易行的检测淋巴细胞活性的好方法。我们采用此法，现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 实验动物和主要试剂及实验仪器 ICR小鼠，体重（20±2）g，雄性，由首都医科大学实验动物部提供。RPM 1640培养液为Hyclone公司产品，噻唑蓝（MTT）为Sigma公司产品，10%十二烷基磺酸钠（SDS）为BRL公司产品，淋巴细胞分离液为TBD生物技术发展中心产品，维生素B1（5mg/ml）、B6（5mg/ml）、B12（0.5mg/ml）均为天津金耀氨基酸有限公司产品，维生素C（400mg/ml）为北京双鹤药业有限公司产品，酶标仪为SLT公司产品（型号为A-5082）。 1.2 方法 (1)淋巴细胞的分离，从ICR小鼠(雄性)眼静脉采血，加入等量细胞分离液，低速离心，吸取淋巴细胞层，洗3次，立即进行淋巴细胞计数，4℃保存在RPM 1640培养液中待用。(2)噻唑蓝比色法，将制备的活的小鼠淋巴细胞分管，分别设实验管（孔）6管（孔），对照管6管（孔）。①VitB1实验组，每6管（孔）分别加入VitB1 400μl(含0.02μg)（6孔）、200μl(含0.01μg)（6孔）、100μl(含0.005μg)（6孔），对照组每孔加入等体积的RPM 1640液（6孔）。②VitB6实验组，每6管（孔）分别加入VitB6 50μl(含0.0025μg)（6孔）、25μl(含0.00125μg)（6孔）、12.5μl(含0.000625μg)（6孔），对照组每孔加入等体积(含的RPM 1640液（6孔）。③VitB12实验组，每6管（孔）分别加入VitB12 400μl(含0.0002μg)（6孔）、200μl(含0.0001μg)（6孔）、100μl(含0.00005μg)（6孔），对照组每孔加入等体积的R