光合细菌筛选中华鳖养殖水质和生产效益影响.docVIP

光合细菌 FP04 的筛选及对中华鳖养殖水质和生产效益的影响 摘 要：从入海排污口污泥中筛选到一株有较强净化养殖水质能力的光合细菌，初步鉴定其为红螺菌，命名为FP04。实验室试验表明，FP04能有效降低养殖污水的CODcr含量。在中华鳖的养殖水体中加入不同浓度的FP04，结果与对照组比较，FP04可显著降低养殖水体中的氨氮和化学需氧量，并可减少甲鱼病害发生，提高甲鱼养殖成活率和增重率，其中以养殖水体中FP04浓度为9×104CFU/mL的效果最好，成活率和增重率分别提高14%和31%。 关键词：光合细菌；筛选；甲鱼；养殖水质；生产效益 随着水产养殖业的发展，养殖密度不断的提 高，养殖用水严重污染、池塘逐年老化、滥用药物导 致抗药性的产生等问题，威胁健康养殖的发展。近 年来，生物制剂特别是微生态制剂的应用备受关 注，并在水产养殖中广泛应用。 光合细菌（photosynthetic bacteria，简称 PSB）是 广泛存在于自然界、具有原始光能合成体系、能在 厌氧条件下进行不放氧光合作用的原核生物 [1] 。光 合细菌对环境的适应力很强，在生长过程中能分解 池塘中的有机物，并能吸收水体中的氨态氮、硫化 氢、亚硝酸盐等有害物质，从而达到净化水质的作 用 [2，3] ，同时光合细菌也具有抑制有害病菌滋生的作 用 [4，5] 。实验室在福建龙海水产养殖基地入海排污口 的污泥中筛选到一株活性较高的光合细菌 FP04。在 甲鱼养殖过程中，投放不同浓度的 FP04 通过检测 养殖池水中的氨氮（NH 4 + -N）和化学需氧量（COD） 动态变化，并测量甲鱼的增重率和成活率，以此评 估 FP04 在甲鱼养殖上的应用价值，为 FP04 的开发 利用提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 培养基与菌源选择 培养基主要成份：NH 4 Cl 1.0 g，CH 3 COONa 3.5 g，MgCl 2 0.1 g，CaCl 2 0.1 g， KH 2 PO 4 0.6 g，K 2 HPO 4 0.4 g，酵母膏 0.1 g，琼脂 20 g （固体培养基用），水 1 000 mL，调整 pH 值 7.2。 菌源筛选采自福建龙海水产养殖基地入海排 污口的污泥。 1.1.2 甲鱼养殖 甲鱼养殖在福建泉州希望甲鱼 场，共 12 口水泥池，分 2 批平行排列，编号 1 # 至 12 # 。每口池面积 12 m 2 ，水深 50 cm，池底铺沙 5~8 cm，挂网袋（约 5 个/m 2 ），罗茨鼓风机增氧，塑料薄膜 覆盖保温，锅炉加温。 养殖甲鱼品种为中华鳖（Trionyx sinensis），规 格 50~60 g/只，无异常现象。 1.2 方法 1.2.1 菌种的富集与分离 取 10 g 污泥于 500 mL 三角瓶中，加液体筛选培养基至瓶颈，液面注入灭 菌液体石蜡以隔绝空气，28 ℃、2 000 lx 光照条件下 培养 7~10 d。当瓶中液体呈现红色时，取 1 mL 液体 进行梯度稀释，涂布固体培养基平皿，石蜡封闭培 养皿，30 ℃、2 000 lx 光照条件下培养 7 d，挑取其 中呈红色的单菌落进行划线分离。 1.2.2 菌种初步鉴定 根据 《伯杰氏细菌鉴定手 册》中细菌形态和生理生化特性等对分离出的菌株 进行鉴定 [6] 。挑取单菌落送至上海生工生物工程技 术服务有限公司进行菌株的 16S rDNA 测序。 1.2.3 菌株对养殖污水的净化效果试验 分别试 验 FP04 菌株在光照厌氧和黑暗好氧条件下对养殖 污水的净化效果，养殖污水取自养殖区内罗非鱼高 密度养殖池。光照厌氧培养，采用 250 mL 容量瓶加 资助项目：厦门海洋研究开发院[K10102（1）] 作者简介：方卫东（1977-），男，工程师，从事海水养殖技术及动物营养研究. E-mail:fw_dong88@126.com 通讯作者：徐长安，高级工程师.E-mail：changan_xu@ doi：10.3969/j.isssn.1004-2091.2012.04.004 水 产 养 殖 Journal of Aquaculture Vol.33，No.4 Apr.1，2012 第 33 卷第 4 期 2012 年 4 月 1 日100 mL 养殖污水，按 5%的接种量接入对数生长期 FP04 菌液，液体石蜡封口，28 ℃、2 000 lx 光照厌氧 条件下培养 72 h。黑暗好氧培养，采用 250 mL 三角 瓶中加 100 mL 养殖污水，按 5%的接种量接入对数 生长期 FP04 菌液，纱布封口，28 ℃、120 r/min 黑暗 条件下震荡培养 72 h。同时设定不加菌液的养殖污 水作为对照，每组 3 个重复，分别测定起始时刻和 72 h 时刻养殖污水的 COD