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分子医学评论
??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????? 克隆羊“多利” 基因测序是确定DNA双股链上每个独立结构单元或碱基的确切顺序的过程。测序经常被称为“破译”,因为其结果就像解码一样。解码结果包含数百页与成千上万行4种字母的序列。这些字母表示4种不同的碱基,分别用它们的首字母A、T、C、G表示,其排列顺序中蕴藏着各种各样的遗传信息和生命指令。 生物信息学((bioinformation) 是一门伴随着基因组研究而产生的交叉学科。广义地说,它是从事与基因组研究有关的生物信息的获取、加工、储存、分配、分析与解释的一门学科。这个定义包含两层意思,即对海量数据的收集、整理以及对这些数据的应用。 基因组,指的是生物体内的所有DNA,包括它的基因。人类基因组计划要测定的是人体23对染色体中的所有DNA的序列,它由31.647亿个碱基对组成,共有3万至3.5万个基因。换句话说,生命天书是由30多亿个字写成的,如果将这30多亿字排版到一张报纸上,那么大约需要20万页纸才能排完这部巨著。 由此可以想见,读取这部巨著所要耗费的时间将是如何的惊人。 解读生命的“天书”人类基因组计划 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????? 英国著名化学家桑格。他因测定出胰岛素的氨基酸排列顺序获1958年诺贝尔化学奖,又因发明测定DNA序列的方法(即桑格法)获1980年诺贝尔化学奖 美国分子生物学家W·吉尔伯特因发明出另一种测定DNA序列的方法,与桑格分享1980年诺贝尔化学奖。 美国生物化学家穆利斯、1993年因创建PCR技术获诺贝尔化学奖。 根据桑格法开发的DNA自动定序机使一周(24小时运转)解读100万甚至几百万个碱基成为可能。它为“人类基因组计划”立下了汗马功劳 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? “人类基因组计划”的主要任务包括: 找出人类DNA上的所有基因(当时估计约10万个,后来证实只有3-3.5万个),确定30亿个碱基对的排列顺序; 建立相应的数据库,进行数据分析,并分析此计划可能带来的人种、伦理及社会问题; 对一些动物的遗传组成进行研究,包括大肠杆菌,果蝇与小白鼠等。 DNA双螺旋结构体现着一种与与谐的大自然之美交相辉映的科学之美。DNA是螺旋状的,生命科学的探索之路也是螺旋的。人体自身和大千世界还有数不清的未解之谜,正等待着人们进行探索。让我们续写和创造永无止境的螺旋之美。 玫瑰的栽培历史可以追溯到5000年前,但通过色素呈现出蓝色的玫瑰却从来没有过。从蓝色三叶草中提取制造蓝色色素的基因,然后注入到玫瑰中,并成功地让翠雀花素单独显色。 目的基因 基因载体 重组体 分 切 接 转 筛 总体技术路线 分: 切: 限制性内切酶 “分子手术刀 ” 限制性 酶活性 缓冲液 甲基化 底物性状 “分子剪刀”的发现者 接: DNA 连接酶 “分子针线” 转: 筛: 基因载体 宿主细胞 克隆位点 大肠杆菌 SS蛋白 重组体 + SS基因 1 E.coli表达体系 优势: 一种成熟的基因克隆表达的受体细胞 繁殖迅速,培养代谢易于控制 易于进行遗传操作与高效表达 不足之处: 1)缺乏适当的转录后与翻译后加工机制。 2)缺乏表达蛋白质复性系统,表达蛋白无特异性空间结构。 3)表达产物不稳定,易被细菌蛋白酶降解。 2 目的基因高效表达 三个因素: 强化蛋白质的生物合成 抑制蛋白质的
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