聚合酶链式反应(pcr)扩增和扩增产物克隆.pdf

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2017-09-10 发布于天津
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聚合酶链式反应扩增和扩增产物克隆第一节概述聚合酶链反应是一种选择性体外扩增或的方法它包括三个基本步骤变性目的双链片段在下解链退火两种寡核苷酸引物在适当温度左右下与模板上的目的序列通过氢键配对延伸在聚合酶合成的最适温度下以目的为模板进行合成由这三个基本步骤组成一轮循环理论上每一轮循环将使目的扩增一倍图这些经合成产生的又可作为下一轮循环的模板所以经轮循环就可使扩增达倍一反应中的主要成份引物反应产物的特异性由一对上下游引物所决定引物的好坏往往是成败的关键引物设计和选择目的序列区域时可遵循下列原则引物长

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆第一节概述 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA 或RNA 的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature): 目的双链 DNA 片段在 94 ℃下解链; (2) 退火 (Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3) 延伸(Extension):在TaqDNA 聚合酶合成DNA 的最适温度下, 以目的