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盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒包封率测定[摘要] 目的 建立盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒包封率的测定方法。 方法 分别采用透析法、离心法和葡聚糖凝胶法分离盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒和游离药物，并计算盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒的包封率。 结果 透析法包封率的测定结果为76.42%，RSD值为1.75%；离心法包封率为46.37%，RSD值为3.26%；葡聚糖凝胶法包封率为79.2%，RSD值为1.61%。 结论 通过比较三种方法的优缺点，葡聚糖凝胶法作为盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒的包封率测定方法最为合适。 [关键词] 盐酸氟桂利嗪；固体脂质纳米粒；包封率；葡聚糖凝胶法 [中图分类号] R972.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）03（c）-0056-03 盐酸氟桂利嗪（flunarizine hydrochloride，FNZ）化学名为（E）-1-[双（4-氟苯基）甲基]-4-2（2-丙烯基-3-苯基）-哌嗪二盐酸盐。类别：血管扩张药。性状：本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末；无臭；无味。本品是一种钙离子通道阻断剂[1]，能防止因缺血等原因导致的细胞内病理性钙超载而造成的细胞损害，适用于脑动脉硬化、脑血栓形成、高血压所致的脑循环障碍、脑出血、头部外伤及其后遗症。固体脂质纳米粒（SLN）结合了聚合物胶束和水包油性脂质纳米乳的优点[2]，同时避免了这两种的缺点，因此是一种特别具有潜力的药物载体[3]。本实验采用盐酸氟桂利嗪作为包封对象，通过溶剂乳化冷却固化法制备盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒，以达到对脑的靶向作用。对于载药固体脂质纳米粒包封率的测定，涉及到游离药物与固体脂质纳米粒的分离。常见的分离方法主要有透析法﹑离心法和葡聚糖凝胶法等。影响包封率的因素很多，如药物-类脂比﹑类脂的种类﹑药物的性质及制备方法等[4]。所以包封的药物不同，固体脂质纳米粒的种类及所用脂质材料不同，适宜采用的测定方法亦不相同。本次实验旨在采用这三种常见的分离方法进行分离，并从中寻找到对于盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒及其游离药物分离的较好方法。 1 仪器与试药 1.1 仪器 0516-1台式离心机（上海医疗器械有限公司），CL-3型恒温加热磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司），JY92-ⅡN超声波细胞粉碎机（宁波新芝科技股份有限公司），S-250D超声波清洗器（宁波科生仪器厂），P230型高效液相色谱仪（大连依利特公司），EC2000色谱工作站（大连依利特分析仪器有限公司），AT-330柱恒温箱（天津奥特赛恩斯仪器有限公司），色谱柱：ODS-C18柱（200 mm×4.6 mm，大连依利特分析仪器有限公司），透析袋（北京科百奥生物科技有限公司）。 1.2 试药 盐酸氟桂利嗪（郑州康瑞制药有限公司，批号，豆磷脂（上海恒信化学试剂有限公司，批号，硬脂酸（浙江日用海盐化工厂，批号，Poloxamer188（南京威尔化工有限公司，批号，SephadexG-50（北京瑞达恒辉科技发展有限公司，批号，甲醇（天津市福晨化学试剂厂，色谱纯）。 2 方法与结果 2.1 盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒的制备 采用溶剂乳化冷却固化法制备盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒。将处方量Poloxamer188在（75±3）℃下分散均匀制成水相；在相同温度下将豆磷脂、盐酸氟桂利嗪和硬脂酸分别溶解于无水乙醇和二氯甲烷中，然后将两者混合均匀成有机相；将有机相逐滴加入水相中，此过程中保持水浴温度在（75±3）℃及水相的搅拌速度为1 000 r/min。然后在该温度下将其混合后的溶液浓缩至8 mL，将浓缩液快速加入另一0℃的水相中，然后经超声波细胞粉碎机超声后即制得分散均匀的盐酸氟桂利嗪固体脂质纳米粒混悬液[5]。 2.2 色谱条件 色谱柱：ODS-C18（200 mm×4.6 mm）；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36 g，加水溶解稀释成1 000 mL，加三乙胺4 mL，用磷酸调pH值至3.5）（75︰25）[1]；流速：1.0 mL/min；检测波长：253 nm；柱温：30 ℃，进样量：20 μL。 2.3 标准曲线的绘制 分别精密吸取浓度为20 μg/mL的FNZ贮备液0.05、0.10、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mL置于10.0 mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 μg/mL的系列溶液。在“2.2”项色谱条件下分别取上述标准系列溶液20 μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。