产酶嗜碱菌多样性.docVIP

黑龙江盐碱湖产酶嗜碱细菌多样性张鸿雁， (1黑龙江八一农垦大学 生命科技学院，黑龙江 大庆，163319) 摘要：从嗜碱微生物的生物应用出发，对其进行系统学研究，来探索有价值的嗜碱菌通过特殊底物筛选从分离到36株产胞外酶菌株(包括纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、木聚糖酶、蛋白酶、甘露聚糖酶)36株菌形态和生理学特征都表现出丰富多样性根据15株菌16SrRNA基因序列进行系统发育分析表明所分离菌株与Halomonas属、Bacillus属、Oceanbacillus属、Salinicoccus属、Lactobacillus属、Pseudomonas属和Marinsprillus属有较高的相似性。通过将系统发育与产酶相关性分析结果表明Bacillus相关菌株酶活性及丰富性较强。关键词：嗜碱；酶；多样性 中图分类号： 文献标识码： Diversity of Alkalibacteria Producing Enzyme from saline-alkali Lakes in Heilongjiang ZHANG Hong-yan, WANG Cheng, QI Gui-na, WANG Bei-yan, SUN Dong-mei (College of Life Science and Technology, Heilongjiang August First Reclamation University; Daqing, china，163319) Abstract：[Objective]The mainly focuses on the diversity of alkaliphilic bacteria in Daqing ,China, in order to explore valuable alkaliphiles. [Method]36 strains were isolated from saline-alkali in Daqing with enzymatic substate medium (including celluase, pectinase, amalyse, xylanase, protease and mananase). [Result]Their phenotypic characteristics and morphology showed that these strains displayed great diversity. Phylogenetic analysis of 15 strains had reavealed that their close relationship with the halomonas,oceanobacillus, salinobacillus, lactobacillus, pseudomonas and marinsprillus. [Conclusion]There are diversified bacteria in saline-alkali Lakes in Heilongjiang，enzymatic activity Key Words : Alkalibacteria, Enzyme, diversity 嗜碱菌碱性酶在生物技术发展中发挥了极大的作用。嗜碱细菌胞外酶最明显的特征是大多数酶为碱性酶，碱性酶有在高pH下稳定的特点，因此可应用于许多涉及到碱性环境的工业生产中。现在已经分离出多种碱性酶，包括碱性纤维素酶[1]、碱性果胶酶[2]、碱性蛋白酶[3]、木聚糖酶[4]，这些酶可能在工业和药理具有重要的和潜在的应用和研究价值。 [5,6]。嗜碱微生物广泛地存在于碱性环境中，如碱湖、碱性荒漠和碱性土壤，中国西藏、新疆、内蒙[7,8] 等地碱湖微生物的研究已有相关报道，而黑龙江省盐碱湖嗜碱菌的研究还未见报导。嗜碱菌研究主要集中于酶学、生理学、生态学、分类学、分子生物学应用方面也有较大发展。本论文就是从应用角度来研究其多样性，。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌菌株分离自本组保存的嗜碱菌株，由不同酶筛选培养基筛选所得。1.1.2 培养基培养基（gl-1）葡萄糖10，蛋白胨5，酵母提取物5，KH2PO4 1，MgSO4 0.2，NaC40，Na2CO3 10（单独灭菌），固体培养基另加15g琼脂粉。筛选将碳源换成对应底物（蛋白酶氮源）（gl-1）淀粉酶可溶性淀粉（0.5）；琼脂糖酶琼脂（0.5）；普鲁兰酶普鲁兰（0.5）；纤维素酶羧甲基纤维素（0.2）；木聚糖酶甘蔗渣（1）；甘露聚糖酶魔芋粉（0.5）；几丁质酶几丁质（0.2）；果胶酶果胶0.5）；海藻酸盐裂解酶海藻酸钠（1）；蛋白酶脱脂牛奶（1）。 1.2.2 酶