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Waters使用注意 流动相及溶剂瓶 使用HPLC试剂或溶剂，含缓冲盐的流动相需过0.45um的滤膜除去微粒物质。更换流动相时应彻底清洗，防止交叉污染。 定期清洗溶剂瓶和附件，防止长微生物。 输液泵 密封垫易于损坏，每天实验结束后一定要认真清洗泵，减少密封垫的损耗，防止密封垫堵塞。使用缓冲盐流动相应更加小心。 使用HPLC试剂时要注意不要使泵的压力过高及时调整泵的压力，上限为3500-4000PSI，下限是50PSI。防止泵堵塞引起压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机。 正确使用色谱泵：使用高品质流动相 溶剂过滤 溶剂脱气 柱塞杆清洗 注意调节流量时的变化速度 进样器 停机前一定要清洗进样器内的样品和无机盐，防止样品和无机盐的沉积造成样品的交叉污染。硬件磨损或管路堵塞。 注射器和样品瓶最好使用仪器自带的不要使用其他仪器的。 防止柱性能下降 溶剂的化学腐蚀性不能太强 避免颗粒物在柱头沉积 柱压不能太高，防止冲击太大 流动相PH小于7时，最好使用粒度同种填料的预柱 滤头加滤片（烧结不锈钢）需要时加保护柱。 长时间不用时要保护好，一定要洗去缓冲盐。加入大于10%的有机溶 剂，将柱两端拧紧，保持柱填料湿润。 检测器 保持清洁，每天使用后和色谱柱一起清洗。 使用脱过气的流动相，防止气泡滞留。 检测灯有一定的使用寿命，超过4小时不用时可以不开。 Wasters HPLC的仪器常见故障及处理方法 脱气不充分（噪声大、出毛刺）用He脱气（600，2695），真空脱气（Degasser,2695,1595）,超生脱气（超声波清洗器） 流动相供给不畅，泵压力不稳，流动相接近用完。溶剂滤头堵塞（有颗粒，长霉） 溶剂瓶或流动相被污染或产生有规则的噪声；基线上升；梯度洗脱出鬼峰。原因：溶剂质量差（含杂质多）；配流动相的玻璃器皿不合格，微生物影响；配流动相的操作不当（过滤，脱气，搅拌） 单向阀 球和阀座黏在一起，堵塞，打不出溶剂。（缓冲盐流动相）用高质量的流动相冲洗。不同溶剂冲洗，如水，甲醇，异丙醇，二氯甲烷，或更换新单向阀。 球和阀座密封不严，压力不稳，气泡进入阀中，紧贴在阀体内，使球难以返回阀座，引起倒流。压力和流速变化大，可能有小晶体颗粒。 清除气泡的办法：打开排夜阀，大流量冲洗，用脱过气的甲醇冲洗，一般可解决问题。 泵垫圈磨损或破碎：高压下压力不稳，从泵头往外渗漏流动相，色谱峰的保留时间会改变。解决方法：更换新垫圈，按操作说明书方法一步一步操作。 输液泵 输液泵垫圈要和流动相匹配协调。多数垫圈是协调的，但有的垫圈适用于甲醇，水，乙腈，但在四氢呋喃中溶解、变粘、变软,需换垫圈时,应向Waters咨询垫圈的 规格型号。色谱工作者一般应学会换密封垫圈。 柱塞杆故障 磨损、漏液(正常损耗) 使用不当被折断(多为安装不合适导致) 柱塞杆被卡住，不能运动。 ? 更换新柱塞杆 初次请维修工程师帮助解决。 。 常见故障：Lost Prime 单向阀的清洗: 如果使用过缓冲盐溶液请使用40 ℃ ~50℃的温水超声20min, 如果使用过纯乙腈请使用异丙醇超声20min如果使用过其他流动相或上述两种溶液超声后请使用纯甲醇超声20min 自动进样系统 b. 注意样品瓶隔垫，防止污染。 c. 进样器针头堵塞（样品、缓冲 盐、隔垫碎片、针头本身)， 可用溶剂清洗，或换新针头。 d. 样品滞留：空白溶剂出色谱峰. 加倍清洗，或调整样品瓶顺序，（从低浓度开始，高浓度放后面） 或在样品瓶前放清洗液瓶 进样系统正确使用步骤: ? 选择适当的洗针溶剂（绿管溶剂）和Seal Wash溶剂 ? 清洗进样针（Needle Wash） ? 清洗柱塞杆密封（Seal Wash） ? 平衡系统 ? Purge 进样器 ? 实验操作 ? 清洗系统 ? Purge 进样器 ? 清洗进样针（Needle Wash） ? 清洗柱塞杆密封（Seal Wash） 注意: 每次进样前仪器会洗针（Needles wash）进样之后不洗针 推荐: 每次批量进完样后手动清洗， 或最后进一针50ul流动相， 如果流动相中有盐的话则用纯净水替代缓冲盐那部分比例。 其它注意事项: ? 打开样品仓盖后，等待样品盘停止转动后再取出 ? 关机前取出所有样品瓶，或将样品盘全部取出 ? 注意保持样品仓内和样品盘清洁 ? 使用微量进样瓶请设定正确的针尖高度值 ? 进样瓶垫损环后，请勿使用其它替代品 其它注意事项: ?仪器右侧的Syringe要 注意不能有气泡，一旦 出现请使用面板上的 Purge Injector功能 色谱柱： 1)塔板数下降 a. 样品处理不合适，选择适当的样 净化方法，选择