《亚麻籽中α—亚麻酸含量的测定 液相色谱法》编制说明.docVIP

《亚麻籽中α—亚麻酸含量的测定 液相色谱法》 标准编制说明 一、标准制定的背景及任务来源 亚麻是我区的优势杂粮作物，亚麻籽中α-亚麻酸的含量很高。而α-亚麻酸是一种多不饱和脂肪酸，是一种必需脂肪酸，是一种生命核心物质，是构成人体脑细胞和组织细胞的重要成分。α-亚麻酸是人体自身不能合成的，也无法由其他营养来合成的，必须要依靠膳食来获得。 为筛选出亚麻优良品种以指导生产，实现亚麻籽中α-亚麻酸含量的准确检测，内蒙古农牧业科学院资源环境与检测技术研究所起草并制定了“亚麻籽中α-亚麻酸的测定 液相色谱法”标准。 二、本标准与国内现有分析方法的技术差异 经过对国内关于α-亚麻酸检测标准的调研发现，目前亚麻籽中α-亚麻酸含量测定多采用GC或GC-MS法，分析过程中柱温高使目标组分易产生异构现象，且需用到数种高制毒试剂。液相标准还属空白。 三、标准编制概况 以内蒙古农牧业科学院资源环境与检测技术研究所近年来对农畜产品加工及农畜产品质量安全检测方法研究为基础，起草并拟订工作计划，具体分以下几个阶段进行： 1.工作进度 2012年上半年，主要通过实地调研及走访，掌握了亚麻品种及其种植范围的大概情况。查阅资料，完成相关资料的收集、整理和实施方案的确定工作。主要参考文献如下： （1）亚麻籽的保健功能和开发利用[J].中国油脂，2006,31(3):71-74 （2）亚麻油中α-亚麻酸含量的测定[J].大理学院学报，2007，6(12):1-3 （3）GB/T 5009.6-2003食品中脂肪的测定 （4）GB/T 5512-2008 粮油检验 粮食中粗脂肪含量的测定 （5）GB 28404-2012食品安全国家标准 保健食品中α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定 2012年下半年，基本确定试验品种范围，样品的采集和制备、试验设备准备及试剂耗材采购。并初步摸索亚麻籽中α-亚麻酸含量测定的实验条件。 2013年上半年，以前一年初步摸索条件为基础，进行了改进优化，确定了标准方法，并以《亚麻籽中α—亚麻酸含量的测定 液相色谱法》征求意见稿为标准，测定了种植范围较广较常见的16个品种亚麻籽中α—亚麻酸的含量。 2013年下半年，选取了“晋亚七号”、“轮选2号”两个品种与自治区级实验室进行了比对试验，对结果进行了统计，对标准方法进行了验证。 实验结果 2.1提取时间及石油醚用量确定 结合资料，对同一亚麻籽的超声波震荡提取进行实验，最终确定提取两次，每次30分钟，分别加石油醚60mL与50mL。 表1 提取时间试验（称取10.00g，每次加石油醚100mL） 提取 时间 15min 1次 30min 1次 45min 1次 60min 1次 15min 2次 30min 2次 45min 2次 60min 2次 得油重（g） 2.4355 3.3125 3.3417 3.4891 3.6114 3.7758 3.7849 3.6998 RSD（%） 15.2 2.17 表2 石油醚加入量试验（称取10.00g，超声波提取30min；2次） 第1次 第2次 得油重 RSD（%） 100 100 3.7758 0.85 100 75 3.7788 100 50 3.7697 100 25 3.7733 80 75 3.7672 80 50 3.7321 60 75 3.6974 60 50 3.7708 40 75 3.7659 40 50 3.6985 20 25 2.1567 — 2.2波长选择 使用PDA检测器进行190 nm至300 nm扫描，发现最大吸收波长为202.9 nm，如图1。但因实测样品的不同，有时会存在干扰且太接近远紫外区，选择205 nm时目标组分响应基本不降低，且基线噪音明显减少，故此选择205 nm。 图1 α-亚麻酸190nm至300nm PDA扫描光谱图 2.3 流动相选择 流动相只用甲醇和水，分离度不理想影响积分，调整水相为0.1%磷酸水溶液后，峰型尖锐对称分离度好。当流动相甲醇与0.1%磷酸水溶液比例为90+10时α-亚麻酸保留时间为10.4 min，如图2；流动相比例95+5时磷酸溶液保留时间6.2 min，如图3。最终选择95+5，分离度好用时短。 图2 甲醇+0.1%磷酸水溶液=90+10（上标品，下试样） 图3 甲醇+0.1%磷酸水溶液=90+10（上标品，下试样） 2.3检出限 表3 北方地区种植面积较广的亚麻品种籽实油脂率 名称 称籽重（g） 得油重（g） 油脂率（%） 晋亚七号 10.00 3.7708 40.00 同亚12号 10.00 4.0381 41.40 陇亚八号 10.00 4.0706 43.20 轮一号