SrDNA序列技术分析鉴定颗粒污泥中的微生物-华南师范大学学报.PDF

华南师范大学学报 （自然科学版） ２０１３年１月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡＮＯＲＭＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ 第４５卷第１期 　　　　　　　　　　　　 Ｊａｎ．２０１３ 　　　　　　　　　　　 （ＮＡＴＵＲＡＬＳＣＩＥＮＣＥＥＤＩＴＩＯＮ） 　Ｖｏｌ．４５　Ｎｏ．１ 文章编号：１０００－５４６３（２０１３）０１－０１００－０５ １６ＳｒＤＮＡ序列技术分析鉴定颗粒污泥中的微生物 １ １ ２ ２ 宋文哲 ，陈　竹 ，陈元彩 ，胡勇有 （１．华南理工大学制浆造纸国家重点实验室，广东广州５１０６４０；２．华南理工大学环境科学与工程学院，广东广州５１０００６） 摘要：采用１６ＳｒＤＮＡ序列分析技术对降解五氯酚的微氧颗粒污泥形成过程中真细菌和古细菌的种群多样性和动态 变化进行了研究．通过对ＤＧＧＥ主要条带进行序列比对，发现颗粒污泥中真细菌和古细菌都与不可培养的微生物相 似性高，微氧颗粒污泥中同时存在好氧菌、微氧菌和厌氧菌．通过比较不同菌的相对数量变化发现五氯酚驯化后的 颗粒污泥中产生了一系列对五氯酚降解有利的优势细菌和古菌，如Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ、Ｍｅｔｈａｎｏｇｅｎｉｃｂａｃｔｅｒｉ ｕｍ等． 关键词：五氯酚；微好氧颗粒；１６ＳｒＤＮＡ序列；微生物菌落 中图分类号：Ｘ７９３　　　文献标志码：Ａ　　　ｄｏｉ：１０．６０５４／ｊ．ｊｓｃｎｕｎ．２０１２．１２．０１５ 　　五氯酚（ＰＣＰ）是具有致畸、致癌、致突变作用的 体系中细菌群落的组成和相对丰度进行了研究，进 难生物降解的异型生物质，作为杀菌剂、防腐剂大量 一步拓宽了对 ＰＣＰ降解微生物多样性的认识．然而 使用，在皮革、纺织、造纸等废水中广泛存在．微好氧 通过比较ＤＥＥＧ条带强度的相对变化从而定量研 颗粒污泥技术将厌氧和好氧在时间和空间上结合起 究ＰＣＰ对污泥中细菌群落动态变化未见报道，本 来，使好氧氧化和厌氧还原同时发生，既节省空 研究通过定量分析污泥中各种菌的相对数量变 间，又可以缩短操作周期，是一种新型的废水处理 化，为解析微氧颗粒污泥的微生物群落结构与群 ［１］ 技术 ． 落动态，从而发现降解ＰＣＰ的优势菌群，为进一步 颗粒污泥内部的微生物生态特征和颗粒污泥对 探索微氧颗粒污泥中微生物降解五氯酚的机理提 水污染物的处理效率直接相关，全面了解降解五氯 供依据． 酚的微好氧颗粒污泥中微生物种类、数量及其动态 性，认识细菌群落的稳定性和功能性等特征具有重 １　材料和方法 要作用［２－３］．传统的微生物法用于环境生物学研究 ［４］ １．１　污泥样品的采集 时环境中只有不超过 １０％的微生物可以培养 ． １６ＳｒＤＮＡ为细胞所共有；其功能同源且最为古老； 污泥样品培养参考文献［２］，分别取自微好氧 既含有保守序列又含可变序列；分子大小适合操作； 颗粒污泥反应器，包括接种污泥、微好氧颗粒污泥以 ［５］ 及用ＰＣＰ驯化后的成熟颗粒污泥．其中微好氧颗粒 它的序列变化与进化距离相适应 ，１６ＳｒＲＮＡ序列 分析作为微生物分类系统的主要依据也得到了广泛 污泥取自溶解氧低于０６ｍｇ／Ｌ的情况下在微好氧 ［６－９］ 颗粒污泥发生器中培养６０ｄ的污泥，ＰＣＰ驯化的成 认同 ． １６ＳｒＤＮＡ技术应用于ＰＣＰ的研究在国内外已 熟颗粒污泥取自用ＰＣＰ从０２ｍｇ／Ｌ增加到６ｍｇ／Ｌ