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RPLC移动相吸光性背景值
RPLC移動相吸光性 背景值
H2O調和 MeOH, AeCN或 THF…由於該等有機溶劑的化學結構式，對於紫外光
( 190-380nm )範圍波長的光束能量具有相當的吸收性，而有 ( Absorbance Unit ) 。
這些一定的光量吸收值吸光性的背景現象，確實存在於紫外光 UV檢測器。該吸
光性的背景，經由電子回授設計的抑制，可以將之“歸零”成為LC 系統的基線
( Baseline ) 。
如下圖所示，MeOH 於UV = 220nm或更低波長，就顯出相當明顯的吸光性，使
得 MeOH 不太適用於UV = 210nm或更低波長的檢測應用。AeCN 於UV = 200nm
或更低波長，才稍有吸光性。因此，經常得採行 UV=210nm或更低波長的檢測，
AeCN 比之MeOH更適用於 RPLC移動相的調和。
( 1 ) Linear Gradient線型梯度增變-基線傾斜漂移
在 220nm較低波長， B項移動相，AeCN 逐量增多，檢測吸光背景逐增，因
而基線隨之上漂。
A%/B%=65 / 35→50min→10 / 90
( 2 ) Step Gradient 逐段梯度增變-基線逐段漂移
A% / B% = 80 / 20 →50min→ 50 / 50 →10min → 10 / 90
( 3 ) Step Isocratic 逐段固定比例增變- 基線逐段隨之變動
A% / B% = 50 / 50 → 20min → 20 / 80
Gradient Elution 基線逐漸上漂，這一現象，特別是在UV較低 220nm波長，
或更低波長如 210nm, 203nm更會明顯地出現基線上漂的狀況。請參照下圖所示 :
Gradient Elution操作 ，改善或減緩基線上漂的建議作法 ?
改用較高* UV波長作檢測
改用純度更高的光譜級有機溶劑*
改用更優質的* HPLC 級H2O
改用較弱吸光性的有機溶劑，例如以* AeCN取代 MeOH
降低感度設定*
*延長梯度時間或減緩梯度增變量
請參照以下圖示 :
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