中国辽宁地区Huntington舞蹈病两家系基因探析.pdfVIP

中国医科大学 硕士学位论文 中国辽宁地区Huntington舞蹈病两家系基因分析 姓名：赵育海 申请学位级别：硕士 专业：神经病学 指导教师：张朝东 2002.3.1 中文摘要 ’鞠二_喜一 di。朗。e，H。，是一种常染 ＼(：0un。in豇。n舞蹈病(Huntingtons 色体显性遗传的神经变性疾病。1983年Gusella等借助限制性片 段长度多态性(RFLP)技术将I-if)致病基因定位于第4号染色体。 Disease CollaborativeResearch Group)通过采用外显子扩增和cDNA克隆 技术完成了对该基因的分离与识别。这个被称作ITl 5(interesting 15)的基因由67个外显子构成。在ITl5基因外显子l transcript 的起始密码子ATG下游17个密码子处有一段多态性的三核苷酸 列的异常扩展突变引起。1 目前在西方国家检测CAG重复序列数已经成为对HI)进行 确定诊断的主要依据。全美医学遗传学学会与全美人类遗传学协 会Huntington舞蹈病工作组根据对欧美人群的大样本检测所得的 分析结果提出以下诊断标准：CAG重复数≤26时为正常等位基 因，不引起疾病；在27—35时为可引起突变的等位基因，不会 引起疾病，但在减数分裂时易发生扩展突变，使后代患病：在36 —39时为不完全外显的HD等位基因，携带者可能发病也可能不 发病：／40时为完全外显的HD等位基因，携带个体必然会患病。 在我国虽然已有关于中国南方人IID基因分析的论著发表， 但由于中国南北方人群在许多遗传特征方面存在差异，而迄今尚 无对中国北方人HD基因CAG重复数进行具体分析的报道。本 实验拟对辽宁地区2个HD家系的3名患者、4名高风险成员及 2名正常人结合临床进行基因分析以便为该病的基因诊断和遗传 咨询提供科学依据。 实验材料与方法 9600 DNA热循环仪，蛋白酶K，LADNA聚合酶， TaqTM 根据文献16l合成两对引物HD1和HD3，DNA分子标记物Marker V。取自辽宁地区2个HD家系(A家系与B家系)的3名患者、 ml／ 4名高风险成员和2名患者的正常配偶共9人的外周静脉血3 人(3．8％枸橼酸钠抗凝)。 …、饱和氯化钠法提取DNA 二、PCR扩增CAG片段 三、测定CAG重复数 实验结果 、发病情况 2个家系一共3名HD患者，发病年龄分别为30、40和22 岁。其中家系A的先证者舢1．4无家族史，属于散发病例。而家 系B则存在明确家族史，而且可以见到发病年龄逐代提前的早现 遗传现象：先证者的祖父BI一1、父亲B11．2及先证者BIII．1本人 的发病年龄分别为62、40和22岁。 二、CAG重复数的分布 一个等位基因的CAG重复数超过了40，分别为49、55和62； 而其无症状亲属及正常配偶被测】2个等位基因的CAG重复数则 重复数在易发生突变的27—35之间，分别为35和29，其余均在