青石斑鱼细胞色素C氧化酶亚基ⅠCOXⅠ基因的克隆-中国水产科学.PDF

第16卷第4期 中国水产科学 Vol.16 No.4 2 0 0 9 年 7 月 Journal of Fishery Sciences of China J u l y 2 0 0 9 COX 青石斑鱼细胞色素C 氧化酶亚基 Ⅰ（ Ⅰ）基因的克隆鉴定及表达分析 1，2 1 1 1 1 1 施大卫 ，王利 ，娄绘芳 ，黄艳青 ，朱保建 ，吴信忠 （1. 浙江大学 动物科学学院，浙江 杭州 310029； 2. 北仑出入境检验检疫局，浙江 宁波 315800） 摘要 ：细胞色素氧化酶（Cytochrome oxidase，COX）是线粒体内呼吸链电子传递的终末复合物，是线粒体氧化能力的关键调 节物质。细胞色素C氧化酶亚基I（COXⅠ）是细胞色素C氧化酶具有酶催化活性的3个亚基之一。本研究以本实验室构 - 建的青石斑鱼消减杂交cDNA文库中长587 bp的EST序列为基础，采用RACE PCR方法克隆鉴定出青石斑鱼（ Epinephelus awoara）细胞色素C氧化酶亚基I基因。研究结果表明：青石斑鱼COX Ⅰ全长1 659 bp，5′端非编码区3 bp，3′端非编码区105 bp，开放阅读框1 551 bp，编码516个氨基酸。序列分析表明，青石斑鱼 COX Ⅰ与线纹刺尾鲷 COX Ⅰ同源性最高，达96.9%。 - Ⅰ基因在青石斑鱼各组织中的表达特征，结果表明 Ⅰ基因在正常的青石斑鱼和注射 采用半定量RT PCR 方法研究 COX COX 了副溶血弧菌灭活疫苗的青石斑鱼的脾、肝、心、头肾、肾、肌肉和鳃中都有转录表达。注射副溶血弧菌灭活疫苗后，除了鳃 [ 组织，其他组织中 Ⅰ基因表达量较对照组都有显著提高（ 0.05），而鳃组织中的 Ⅰ基因表达量没有显著变化。 中 COX P COX ] 国水产科学，2009，16（4）：467-476 关键词：青石斑鱼；细胞色素C氧化酶；克隆；表达分析；副溶血弧菌灭活疫苗 中图分类号：Q959.6　　　　　　 文献标识码：A　　　　　　 文章编号：1005-8737-（2009）04-0467-10 细胞色素C氧化酶（Cytochrome oxidase，COX）是 分子，在真核细胞中，该酶作为一种跨膜整合蛋白存 线粒体呼吸链电子传递的终末复合物，是含血红素- 在于线粒体内膜上（不对称地横跨在膜上）。哺乳动 铜（heme/copper）终端氧化酶的超家族（细胞色素C氧 物的COX由13个亚基组成，其中最大的和疏水性最 化酶Cox和辅酶Q氧化酶UQox）成员之一，是调节线 强 的3个