RNA干扰Grp78蛋白对肺癌细胞A549作用探究.docVIP

RNA干扰Grp78蛋白对肺癌细胞A549作用探究【摘要】 目的 探讨采用RNA干扰Grp78蛋白表达，观察对肺癌细胞A549的作用。方法 通过转染Grp78的siRNA质粒到肺癌细胞A549并进行表达，观察A549细胞的Grp78蛋白的表达及细胞的侵袭和转移能力的变化。结果 RNA干扰肺癌细胞A549的Grp78的表达，能够显著地抑制癌细胞的黏附、伸展，以及MMP-2，MMP-9蛋白的表达，甚至诱导细胞凋亡。结论 siRNA特异性下调Grp78蛋白，可以抑制肺癌细胞A549的侵袭和转移，甚至导致细胞凋亡。? 【关键词】 RNA干扰； Grp78； 肺癌细胞?? Roles of RNAi of Grp78 on lung cancer cell A549 ?SONG Xiao-ping，LI De-hua,XI Huan-jiu.Department of Anatomy,Liao Ning Medical University,Jin Zhou 121001，China?? 【Abstract】 Objective To investigate the roles of RNAi of Grp78 on lung cancer cell A549.Methods To observe changes of invasions and metastasis of lung cancer cell A549 induced by transfection and expression of siRNA of Grp78.Results RNAi could interfere expressing of Grp78 of lung cancer cell A549, which depressed adhesion and migration of lung cancer cells, and expressing of MMP-2 and MMP-9 proteins significantly,even induce cell apoptosis.Conclusion The specifically downregulation of Grp78 protein induced by siRNA transfection, which could depress invasion and metastasis of lung cancer cell A549,even induced cell apoptosis.? 【Key words】 RNAi; Grp78; Lung cancer cells 肺细胞癌是一种恶性程度极高的肿瘤，肺癌患者术后复发率高，极易转移，预后差，因此，探寻有效的抑制肺癌侵袭和转移的方法及其机制极为重要。肺癌的侵袭和转移是一个十分复杂的过程，其中肿瘤细胞侵袭血管壁/淋巴管壁是最关键的步骤之一，抑制肿瘤细胞的血管壁/淋巴管壁的侵袭，可以有效抑制肿瘤的侵袭和转移过程。研究表明，上皮-间叶转化(epithelial-mesenchyuial-transition,EMT)是大多数上皮型肿瘤（包括肺癌）发生侵袭和转移的基础，上皮型肿瘤细胞必须首先发生上皮一间叶转化，获得间叶细胞的表型后才能发生侵袭和转移。目前已经发现了许多参与肿瘤的侵袭和转移过程调控的信号分子如小GTPase(包括Rac,RhoA和Cdc42)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、整联蛋白连接激酶(integrin-linked kinase，ILK)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF)等。人们一直尝试通过干预这些信号分子的表达和活性达到抑制肿瘤的侵袭和转移的目的，但没有取得预期的效果，这可能是由于靶蛋白的功能比较单一，与其他的信号通路缺乏必要的通讯。? 葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,Grp78)是由细胞的内质网合成、分泌的一种蛋白质，属于Hsp70家族??［1］?。过去学者们一直认为Grp78是一种定位于内质网腔中的蛋白质，起分子伴侣的作用。近年来随着研究的不断深入，人们发现Grp78除了驻留在内质网腔中起到分子伴侣的作用外，还可以转运至细胞膜，甚至分泌到细胞外，参与细胞分化、细胞生存、血栓形成等重要生物学过程的调控，是一种多功能蛋白质。在肿瘤细胞中，Grp78也参与肿瘤的发生与进展??［2~4］?，以及肿瘤的耐药性调节??［5］?，但Grp78对肿瘤的侵袭和转移调节机制国内外报道较少。