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第20章高效液相色谱(修改)
分析化学教程;§20.1 概述 §20.2 高效液相色谱法的分类与基本原理 20.2.1 高效液相色谱法的分类 20.2.2 基本原理 §20.3 各类高效液相色谱法 20.3.1 液-固吸附色谱法 20.3.2 液-液分配色谱法 20.3.3 化学键合相色谱法 20.3.4 其他色谱法;§20.4 固定相 20.4.1 液-固色谱固定相 20.4.2 化学键合相 20.4.3 其他固定相 §20.5 流动相(溶剂系统) 20.5.1 分离方程式 20.5.2 Snyder溶剂分类 20.5.3 正相洗脱与反相洗脱 20.5.4 洗脱方式; 20.5.5 流动相最优化方法简介 §20.6 高效液相色谱仪 20.6.1 输液泵 20.6.2 色谱柱与进样器 20.6.3 检测器 20.6.4 超高效液相色谱仪 §20.7 定性、定量分析方法 20.7.1 定性分析方法 20.7.2 定量分析方法;高效液相色谱法概述; 高效液相色谱法 HPLC (high performance liquid chromatograph) 高压输液泵 高效固定相 高灵敏度检测器;高效液相色谱法与经典液相色谱法的比较 见表;涡南井娱踢粕聋俩茎孺想孩捉威绳轰烛耽酣胯锚屎陪昔弊籽抠贷合氓栗典第20章高效液相色谱(修改)第20章高效液相色谱(修改);礼弥讶屑黍横袋眉骑枝般铰伟伍抢截助亦共槽吴友缴一俺轮诈题墨朽圣炭第20章高效液相色谱(修改)第20章高效液相色谱(修改);高效液相色谱法与GC的比较 见表;孔脊牙熔颊宏抓绸惶绑伴肋捶黍畏疟材复槽诣益义侧嘻围沙窄抠掇敦淑学第20章高效液相色谱(修改)第20章高效液相色谱(修改);癌藤阳相歉昂遭侨裸淬抢给鬃鼻潞超屿听职凋畸肉惮烫叉袋森冕谊鹊衙妇第20章高效液相色谱(修改)第20章高效液相色谱(修改); 高效液相色谱法的 分类与基本原理;20.2.1 高效液相色谱法的分类 按固定相的聚集状态: LLC和LSC 按分离机制: 分配、吸附、离子交换(IEC)、空间排阻(SEC)、亲合(AC)、手性(CC)、胶束(MC)、电色谱法(EC)。;HPLC;20.2.2 高效液相色谱法的基本原理;讨论: 涡流扩散项:填料和填充均匀程度;纵向扩散项;传质阻力项;温度一般为室温;综上所述,HPLC应采用:;流速;各类高效液相色谱法;20.3.1 液-固吸附色谱法;若以硅胶为固定相: 洗脱剂:以烷烃为底剂,加适量极性调整剂组成的二元或三元流动相。流动相应该不含水。;20.3.2 液-液分配色谱法;20.3.3 化学键合相色谱法;化学键合相的优点 均一、稳定;不易流失,使用周期长;柱效高;重现性好。 ;反相键合相色谱法(RBPC或RHPLC) 固定相:在载体表面键合含弱极性或中等极性的基团,如十八烷基硅烷(C18)(ODS柱)、辛烷基(C8)、甲基(-CH3)、苯基等。 ;流动相:以水做主体,加适量的极性调节剂增加选择性如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。 出峰顺序: 极性强的组分先出柱,极性弱的组分后出柱。;影响保留时间的因素: 溶质的分子结构: 极性越弱,保留时间越长。 流动相的表面张力、介电常数和pH值: 对于二元或多元体系改变溶剂的配比可改变流动相的表面张力和介电常数。通常,流动相中有机溶剂含量增加,k变小。;正相键合相色谱法 固定相:在载体表面键合含中等极性或较强极性的基团,如氰基(-CN)、氨基(—NH3)、或二羟基等。 流动相:以非极性或弱极性的溶剂如己烷、庚烷等为主体,加适量的极性调节剂增加选择性如乙醚、氯仿、二氯甲烷等。;出峰顺序: 极性弱的组分先出柱,极性强的组分后出柱。 影响保留时间的因素: 键合相的种类、流动相的强度、试样的性质。 流动相的极性增强,洗脱能力增加,保留时间缩短。 ;适应范围: 分离溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物。 ;反相离子对色谱法(R
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