池吸收宽带紫外光度检测器的研制.pdf

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　仪器装置与实验技术 第 6 期 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　 2003 年 6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 755～759 仪器装置与实验技术 薄池吸收宽带紫外光度检测器的研制 申华莉　许崇峰　黄珍玉　杨　原 (复旦大学化学系 ,上海 200433) ( 摘　要 　设计和制作了利用宽带吸收技术进行宽带表观吸光度测定的薄池宽带紫外光度检测器 large bandwidth UV absorption detector , 简称LBUAD) ,并进行了性能表征。该检测器在光学系统上采用氘灯做为紫外 光源 ,通过宽带紫外玻璃得到入射宽带光 ,并利用中心对称的双透镜聚焦光学系统对宽带光进行聚焦 ,聚好的 光斑通过蓝宝石球进一步会聚后照射吸收池 ,然后进行检测。毛细管薄池中系列高锰酸钾溶液的表观吸光度 测定结果表明 :该仪器的动态范围为 2～3 个数量级 ,对硝基苯肼的表观吸光度测定结果表明 ,其检出限达到 10- 6 AU ,基线漂移小于 0. 001 AUh 。与商品DD2000 紫外检测器的比较以及在实际电泳分离中的检测进一步 表明 :该仪器具有很好的检测性能。 关键词 　薄池 ,宽带吸收 ,紫外吸收 ,光度检测器 ,毛细管电泳 1 　引　　言 毛细管电泳是一种高速 、高效、微量的液相分离技术 ,现已广泛的应用于环境分析、药物分析以及生 命物质的分析。检测电泳分离后的微量化学物质是毛细管电泳仪器发展的一个挑战性的工作。在线光 度检测是最简单、通用和直接的检测手段。毛细管作为一个薄型吸收池 ,光程仅为 20～100 μ m ,光度检 ( ε) ε 测灵敏度较低。由朗伯比尔吸收定律 A = lc 可知 ,光度检测的灵敏度为 l ,提高灵敏度的直观的方 法是采用摩尔吸光系数比较大的显色体系和增加吸收光程 ,其中后者更具有普适性。目前的做法有采 用泡型池1 、多重反射池及轴向吸收池等2 ,但是增加的光程是有限的 ,并没有完全解决这一问题。 我们提出和验证了测量薄池光吸收的新技术3 ,指出在薄池吸收测量场合 ,可以采用宽带吸收技术 来测定表观吸光度或吸收强度 ,通过提高入射光强度来提高测定的信噪比 ,从而降低检出限。为了研究 ( ) 宽带吸收技术的特性和实现方式 ,我们设计和制作了新型的薄池宽带紫外光度检测器 LBUAD ,并且对 该仪器的性能进行了测试。 2 　薄池吸收宽带光度检测基本原理 当吸光度值 A 相对比较小时 ,若 A 0. 05 , 由朗伯比尔定律,可以导出如下的吸收公式4