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JKA-2,HSP,hMSH2,WNT-1及FZD-1基因蛋白表达与卵巢癌紫杉醇化疗耐药相关性的研究
JAK2,HSP, hMSH2 ,WNT-1及FZD-1基因蛋白表达与卵巢癌紫杉醇化疗耐药相关性的研究 李.＊李.霞 首.医.大.附.北.世.坛.院.科,北.，100038 摘要目的: 检测紫杉醇化疗后卵巢癌组织中JAK2,HSP, hMSH2 ,WNT-1及FZD-1基因蛋白表达的变化，探讨其与卵巢癌紫杉醇耐药的关系及临床意义。 方法: 采用免疫组化二步法，检测58例卵巢癌组织中JAK2,HSP, hMSH2 ,WNT-1及FZD-1基因的蛋白表达。其中，术后紫杉醇化疗后复发患者19例(化疗组)，术前未化疗患者39例（未化疗组）；病理类型：浆液性乳头状囊腺癌29例，子宫内膜样腺癌12例，粘液性囊腺癌6例，移行细胞癌6例，透明细胞癌5例；手术病理分期：I 期10例，II期8例，III 期34例，IV期6例；病理分级：高-中分化16例，低分化42例。结果: 1．化疗组与未化疗组相比JAK2,HSP, hMSH2的蛋白表达光密度值明显增加（分别为：36987.38±16873.42 vs 27756.29±7136.09；34905.64 ± 12361.87 vs 26684.56 ± 12662.24；74322.52 ± 27162.82 vs 57244.96 ± 24332.86），而WNT-1及FZD-1的蛋白表达光密度值明显降低(分别为30931.34 ± 16420.04 vs 45917.65 ± 12015.39；38625.20 ± 19689.97 vs 55585.82 ± 26330.13)，以上差异均有统计学意义（P0.05）； 2．蛋白表达与病理参数的关系：化疗组WNT-1蛋白表达在子宫内膜样腺癌中明显低于浆乳癌（ 19215.88±6506.49 vs 43193.53 ±16803.05，P=0.014）；未化疗组各基因蛋白表达在年龄、临床分期，分化程度和病理类型中均无显著性差异。3．各基因蛋白表达相关性：两组中JAK2、HSP、hMSH2蛋白表达3者间均呈正相关关系(r=0.330、0.277、0.290，P值均0.05)； FZD-1与WNT-1蛋白表达呈显著正相关（r=0.479，p=0.000）；FZD-1与 JAK2蛋白表达呈负相关关系(r=-0.261，p=0.048),但与HSP、hMSH2 没有相关性(r=0.153,-0.074, P 0. 05)。化疗组中HSP与hMSH2蛋白表达呈正相关（r= 0.695、p= 0.001）；WNT-1、FZD-1蛋白表达呈正相关（r=0.551、p=0.015）。未化疗组中JAK2与hMSH2 蛋白表达呈正相关（r=0.363、p=0.023）；WNT-1与FZD-1蛋白表达呈正相关（r=0.345、p=0.032）。结论JAK2、HSP、hMSH2 基因蛋白表达上调及WNT-1、FZD-1基因蛋白表达下调可能与卵巢癌紫杉醇化疗耐药有一定相关性。 关键词JAK2，HSP，hMSH2 ，WNT-1，FZD-1，卵巢癌，紫杉醇耐药 卵巢癌是女性生殖器官常见的三大恶性肿瘤之一, 发病率居第3位，仅次于宫颈癌和子宫内膜癌，但是死亡率却居妇科肿瘤首位，严重影响妇女的健康和生活质量。目前，紫杉醇(Taxol,TAX)与铂类联合化疗已成为卵巢上皮性肿瘤的标准化疗方案，但随着用药时间的延长，针对紫杉醇所产生的耐药现象日益明显。为阐明紫杉醇的耐药机制，本课题组在前期研究中建立了紫杉醇耐药的卵巢癌细胞系OC3/TAX300，利用消减杂交和基因芯片技术发现OC3/TAX300中JAK2、HSP、hMSH2等基因表达上调， FZD-1、WNT-1等基因表达下调[1-2]。进一步采用RT-PCR技术检测紫杉醇耐药的卵巢癌组织，发现基因水平表达与上述结果一致[3,4]。本课题拟通过检测临床卵巢癌组织标本中这5个基因的蛋白表达情况，进一步验证其在基因水平的表达信息，并分析其临床意义。 1. 材料和方法 1.1 标本来源： 选择本院近5年手术治疗的卵巢癌患者石蜡标本58例，其中，术后紫杉醇化疗后复发患者标本19例(化疗组)，术前未化疗患者标本39例（未化疗组）。患者年龄：40-81岁，平均年龄55 岁；手术病理分期：I 期 10例，II期 8例，III 期 34例，IV期 6例；组织学分级：高-中分化16例，低分化42例；病理类型：浆液性乳头状囊腺癌29例，子宫内膜样腺癌12例，粘液性囊腺癌6例，移行细胞癌6例，透明细胞癌5例。 1.2 主要试剂： 第七届中国肿瘤学术大会暨第十一届海峡两岸肿瘤学术会议论文汇编 优秀论文 261 JAK2抗体(3230S) 购于Cell Signaling Technology；HSPC154抗体（16641-1-AP
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