ESI-MS技术在中药分析中的应用及裂解规律.docVIP

ESI-MS技术在中药分析中的应用及裂解规律 S0820349成小兰 S0820350弓 贞 S0820356魏焕莉 S0820360李 英 S0820361马 江 S0820364杨 华 S0820370刘 慧 S0820374刘 朋 S0820383黄 洁 S0820386鲍泽浪 S0820389马荣华 S0820391王怀友 摘要：近年来，电喷雾质谱（ESI-MS）因其离子化条件温和，谱图简单等特点，正被广泛应用于天然产物的分析研究。本文介绍了它在中药成分的定性定量分析，体内代谢分析及中药配伍规律等方面的应用，并分析了其未来发展方向，同时针对不同化合物类型在ESI-MS下的裂解规律进行了总结。 关键词：电喷雾质谱，液质联用，串联质谱，碰撞诱导解离，应用，裂解规律 中药是一个极其复杂的化学物质体系，其发挥作用的物质基础是其有效成分。利用先进的科学技术阐明中药有效成分是中药质量控制的基础与核心，是中药材及其产品安全、有效和质量稳定、可控的保障，是中药走向现代化的关键。但中药成分复杂，难于进行分析，一直是中药研究中的难点。 目前，质谱在对中药有效成分的简便、快速分析过程中起着越来越重要的作用。早期的质谱主要为电子轰击质谱（EI-MS）和快原子轰击质谱（FAB-MS）。随着软电离技术的出现，电喷雾质谱（ESI-MS）被广泛应用于天然产物的分析研究。电喷雾质谱离子化条件温和，谱图简单，特别适用于极性和热不稳定天然化合物分析，其一级质谱主要产生准分子离子峰，而多级质谱能提供化合物的结构信息，是研究复杂体系的灵敏、快捷和有效的现代分析方法[1~4]。 ESI是一种离子化技术，它是在高静电梯度（约3kv/cm）下，使样品溶液发生静电喷雾，在干燥气流中，形成带电雾滴，随着溶剂的蒸发，通过离子蒸发等机制，生成气态离子，以进行质谱分析。ESI使溶液离子化主要经历三个步骤：①在喷雾毛细管尖端产生带电雾滴；②通过溶剂蒸发和雾滴分裂使带电雾滴变小，这一过程反复进行，直至生成很小的带点雾滴；③由很小的带电雾滴产生气相离子。与快原子轰击（FBA）和等离子解吸（PD）相比，ESI在相对比较低的温度下，逐步去溶剂化，是迄今最软的质谱离子化技术。 液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）是以高效液相色谱为分离手段，以质谱为鉴定工具的一种分离分析技术。它将高效液相色谱对复杂样品的高分离能力与质谱具有的高选择性、高灵敏度以及能够提供分子量与结构信息的优点结合起来，成为一种强有力的分离分析工具。自从20世纪80年代末ESI-MS商品化以来，LC/ESI-MS已经迅速成为应用最广泛的联用技术[5]。本文综述了ESI-MS在中药成分的结构鉴定、定性定量分析、中药代谢产物鉴定以及中药配伍规律研究等方面的应用，并分析了其存在的问题及应用前景。此外，在文章后半部分，还总结了几大类型化合物的ESI-MS裂解规律，对日后的化合物质谱解析有一定的指导意义。 一、ESI-MS在中药分析中的应用 1.中药成分的定性定量分析研究 待测样品经预处理后，可以在少量样品的条件下，采用LC-ESI-MS或者LC-ESI-MSn结合LC-DAD-UV技术进行分析，得到UV图谱、总离子流图及各个组分的各级质谱图，并与标准化合物的保留时间、紫外吸收光谱和质谱中的准分子离子峰[M+H]+，[M+Na]+及特征碎片峰等对比或直接参考文献，可以快速鉴定中药的化学成分，并进行定量分析。 皂苷类成分的分析方法有HPLC-UV和HPLC-ELSD法等，但该类化合物没有共轭结构，仅在低波长端有紫外吸收，易受杂质和溶剂背景吸收的影响；而ELSD检测器虽然对皂苷类化合物有较好的响应，但是在分析成分复杂的中药体系时，只依靠保留时间作为定性指标，难以确证色谱峰的纯度，使定量结果存在误差。而ESI-MS为化合物定性提供了快速准确的鉴定手段。Lai等人[6]采用HPLC-ESI-MS/MS联用技术，通过保留时间、分子量和二级质谱的信息，对中药复方血塞通注射液中的27种皂苷成分进行了定性分析，同时还对其中的9种皂苷，包括三七皂苷R1，人参皂苷Rb1, Rb2，Rb3，Rc，Rd，Re，Rf 和Rg1进行了定量分析。王铎等[7]应用高效液相色谱-电喷雾/飞行时间质谱联用技术(HPLC-ESI/TOF-MS)采用人参皂苷Rg1作为内标物,以目标化合物加钠离子[M+Na]+为检测离子,测定了步长脑心通中8种黄芪皂苷类成分的含量。各黄芪皂苷的检测限为0.10～0.22 ng,0.22～0.52 ng(As/ Ai)的日间精密度(RSD)和日内精密度(RSD)均小于2.86%，回收率大于94.9%。 李忠红等[8]采用HPLC-ESI-MS/MS对小续命汤抗脑缺血有效成分的醇溶性成分进行分析，鉴定了生物碱类、