蛋白质含量测定中硫酸铵的参比作用王亚棋12黎隽1刘立科1.DOCVIP

蛋白质含量测定中硫酸铵的参比作用 王亚棋1,2，黎隽1，刘立科1，刘东鸣1，张垚1，马力1，李剑利2* （1.陕西省医疗器械检测中心，西安，710075；2.西北大学化学与材料科学学院，西安，710127） 摘要：目的 中国药典2010版附录Ⅶ D 氮测定法第二法，是蛋白质含量测定的经典方法。但参考蛋白难于获得，检测结果缺乏参比性。本文尝试以分析纯硫酸铵为参考品，检测关节软骨再生支架样品中的蛋白质含量。方法 分别称取三份硫酸铵，与蛋白样品一起，在相同条件下测试其回收率，用以参照评价蛋白样品的检测结果。结果 硫酸铵的回收率接近100%，不考虑消化样品的差异，可以确认样品测定结果。 结论 在没有标准蛋白作参比的情况下，在凯氏定氮法中引入硫酸铵，可以很好的监测实验结果。 关键词：蛋白质；测定；硫酸铵 中图分类号：Q5-33 文献标志码：A 文章编号： The significance of ammonium sulfate in the determination of concentration of protein Wang Yaqi1,2，Li Jun1，Liu Like1，Liu Dongming1, Zhang Yao1，Ma Li1，Li Jianli2 （1.Shaanxi Medical Devices Testing Centre，Xian，710075；2. College of Chemistry Materials Northwest University，Xian，710127） Abstract: Objective To determinate the concentration of protein, the second method of nitrogen measurement in appendix D of Chinese pharmacopoeia 2010 edition is always used. The complicated experiments used to leads puzzling result, for there is not right reference protein. We tried to find a way to determinate the concentration of protein in regeneration scaffold of articular cartilage by using ammonium sulfate. Methods triplet ammonium sulfate taken was used as reference to determinate the concentration of protein in the samples. Results we got a nearly 100% recovery rate of ammonium sulfate irrespective of the difference digestion with protein samples. Conclusions In the case of getting no protein reference, Ammonium sulfate could be used as reference in the kjeldahl determination to improve the credibility. Key words: Protein; Determination; Ammonium sulfate ___________________________ 作者简介：王亚棋，男，1972年生，博士，主要从事医疗器械检测工作。 * 联系人。E-mail:sxkeyan@163.com 蛋白质是由氨基酸以酰胺键( 肽键) 相结合形成的结构极其复杂的高分子化合物, 是生物体中的主要含氮物质。蛋白质与细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质转运和遗传等密切相关, 蛋白质的定量测定是生物化学和其他生物科学、食品检验、临床检验、疾病诊断和质量检验中最重要的工作。蛋白质测定方法一般可分为间接方法和直接方法。间接方法是通过测定样品中蛋白质的含氮量进行推算蛋白质含量的方法。直接方法则是根据蛋白质的物理和化学性质, 直接测定蛋白质含量的方法。多年来, 利用蛋白质的主要性质( 如含氮量、肽键、折射率等) 和利用蛋白质含有的特定氨基酸残基( 如芳香基、酸性基、碱性基等) , 测定蛋白质的方法不断发展, 主要有凯氏定氮法( 国际经典测定方法) 、分光光度法、电化学法、滴定法、高压液相色谱法、电泳法、免疫法等[1