波长重复性.PPT

LAMBERT-BEER定律 A = log — = - log T = e C l = abc吸光度、透过率与浓度的关系（波长、吸收池光程一定） 紫外/可见分光光度计的基本结构 光源 单色器 样品室 检测器 控制放大电路 显示器 比色皿 光电管（或光电池） 放大器 单色光 显示器 单光束紫外/可见分光光度计  斩光器  单色光 光电管（或光电池） 放大器  反光镜 双光束紫外/可见分光光度计  比色皿 光电管（或光电池）  斩光器 放大器单色光 显示器 光电管（或光电池） 准双光束紫外/可见分光光度计  S1  准直镜 切尼尔-特纳 G 单色器结构 S2 准直镜 第二篇紫外/可见分光光度测定的一般方法 （一）定量分析一、绝对法 基于朗伯-比尔定律A = ebC ，当某一物质在一定波长下e（吸收系数，可由已知浓度样品通过测量、计算求得）为一常数，比色皿的光程也是已知，也是一个常数，只要在吸收系数指定的波长处测定样品溶液的吸光度值(OD值)，然后由下式求得该样品溶液的浓度或含量： C = A / e b 二、标准对照法  在同样条件下，在选定的波长处，分别测定已知浓度标准溶液的吸光度值A标和样品溶液的吸光度值A样，然后由下式求得样品溶液的浓度或含量： C样 = A样 ? A标 ? C标 三、标准曲线法（包括K因数法） 最常用的定量分析方法。即在一定波长（λmax）下测定某物质的标准系列溶液的吸光度作校正曲线，然后测定样品溶液的吸光度值，由校正曲线求得样品溶液的浓度或含量。 所配置的标准系列溶液的吸光度应在0.1?1.5Abs范围内，吸收测定的精密度可达0.5%。 注意：UV/Vis的最低检测浓度与吸收系数、仪器噪声、基线平直度、光谱带宽有关。而最高检测浓度则与吸收系数、仪器的杂散光、光谱带宽等有关，吸收系数与光谱带宽有关。杂散光越小，检测上限越高。 四、双波长法 标准溶液澄清透明，待测样品浑浊或含有一种与吸收峰临近的干扰成分，对待测成分主吸收波长的吸光度有叠加影响，干扰成分随待测成分浓度变化或无法将干扰成分加入标准溶液中，则必须用双波长法扣除这种干扰成分对待测成分吸光度读