化工工业分析技术课件单元二 液相色谱仪的基本组成(上课).ppt

《工业分析技术》PPT 液相色谱仪 液相色谱仪 高效液相色谱仪 高效液相色谱仪的结构示意见图，一般可分为4个主要部分：高压输液系统，进样系统，分离系统和检测系统。此外还配有辅助装置：如梯度淋洗，自动进样及数据处理等。其工作过程如下：首先高压泵将贮液器中流动相经过进样器送入色谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入待分离的样品时，流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分离，然后依先后顺序进入检测器，记录仪将检测器送出的信号记录下来，由此得到液相色谱图。 由于高效液相色谱所用固定相颗粒极细，因此对流动相阻力很大，为使流动相较快流动，必须配备有高压输液系统。它是仪器最重要的部件：由储液罐、高压输液泵**、过滤器、压力脉动阻力器等组成。 对高压输液泵的要求：密封性好，输出流量恒定，压力平稳，可调范围宽，便于迅速更换溶剂及耐腐蚀等要求。 高效液相色谱仪 常用的输液泵分为恒流泵和恒压泵两种。 2．进样系统 进样器、进样口、进样阀 3、 分离系统——色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有限，故金属管用得较多。一般色谱柱长5～30cm，内径为4～5mm。 一般在分离前备有一个前置柱，前置柱内填充物和分离柱完全一样，这样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱和，使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定相，保证分离技术的性能不受影响。 柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料（＜20μm）一般采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，然后在高压泵作用下，快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内，经冲洗后，即可备用。 4．检测系统 HPLC与GC一样，要求检测器灵敏度高，重现性好，定量准确，对温度和流速的变化不敏感，应用范围广，线性范围宽等优点 检测器分为两大类：一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物理或化学特性有响应，属于这类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等。 另一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于这类检测器的有示差折光，电导检测器等。现将常用的检测器介绍如下: 高效液相色谱检测器： 高效液相色谱检测器： 光电二极管阵列检测器 通用型检测器。它的作用原理是纯流动相与包含样品的流动相之间的折射率不同，检测器把这种差值检测出来，给出信号，信号的大小与样品含量成正比。 纯流动相与待测组分的折射率相差越大，检测器灵敏度越高，灵敏度可达10-7g·cm-3。 通用性强，不破坏样品，线性范围宽。主要缺点是灵敏度低，不适宜痕量分析。对温度变化敏感，并且不能用于梯度淋洗。 响应特性 通用性检测器 低灵敏度 基线易受温度的影响 不适合梯度洗提 响应特性 选择性检测器。如PAH，蛋白质 高灵敏度，比紫外高约1000倍 适合梯度洗提 响应特性 选择性检测器，对离子型化合物有响应 灵敏度高 受温度的影响 不能梯度洗提 它包括脱气、梯度淋洗、恒温、自动进样、馏分收集以及数据处理等装置。其中梯度淋洗装置是高压液相色谱仪中尤为重要的附属装置 . 梯度洗提 梯度洗提 即程序控制流动相的组成，使在整个分离过程中，溶剂强度按照特定的变化规律增加。 优点：分离复杂混合物，使所有组分都处在最佳的k值范围内。 缺点：检测器的使用受到限制，分析结果的重复性取决于流速的稳定性。柱子需进行再生处理。 (3)荧光检测器 (4)电导检测器 ? 示差折光 紫外 荧光 电导 应用范围 通用 选择性 高选择性 选择性 可否梯度淋洗 不可 可 可 不可 线性范围 104 105 103 104 最小检测量 μg ng pg ng 对温度敏感度 敏感 低 低 敏感 溶剂使用情况 无限制 受限制 受限制 受限制 几种检测器特性比较 HPLC梯度淋洗与GC中的程序升温一样。 对于某些复杂样品，组分的k′范围很宽，用一种强度的溶剂淋洗时不能得到很好的分离，采用梯度淋洗。就是组成流动相的两种或两种以上不同的溶剂按一定程序改变配比、极性、pH、离子强度、通过流动相极性的变化来改变待分离样品的选择因子和tR，提高分离效果和分析速度。 5、附属系统 * * * 开封大学化学工程学院 情景五 有机化工产品分析 项目二 食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定 任务一 食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定（液相色谱法） 单元一 液相色谱仪的基本组成 课后体会 知识目标：了解果汁中防