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区试DNA培训-赵久然课件
中国玉米标准DNA指纹库构建北京市农林科学院玉米研究中心赵久然;推广情况
≧5万亩品种 约300个
≧100万亩品种 约60个
审定情况
已国审品种 约200个
已审定品种 1000多个
每年新审定品种数以百计
每年参加国家及省区试品种数以千计
保护情况
已获得品种权的品种 400多个
已申请品种权的品种 1000多个
自1999年,每年新申请保护品种数量逐年上升;形态鉴定为主,同工酶
和蛋白电泳鉴定为辅;;;五、承担玉米DNA指纹鉴定相关研究项目;六、目前研究现状情况;1.通过各种标记方法比较确定选用SSR标记; 分子标记的类型;各种分子标记方法比较;2.针对SSR标记存在问题进行SSR技术体系优化 ;
从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了全面优化,最终建立如下SSR标准实验体系
DNA提取:单粒种子及其它组织均研究出快速提取法
改良的玉米单粒种子DNA提取法
两步法高通量快速提取叶片
PCR扩增:由4h减少为2h
普通电泳检测:测序胶电泳,约需30-40min;
快速银染法,由1.5h减少为约20min
毛细管电泳检测:96道毛细管电泳结合五色荧光检测系统。
每检测96*10=960个样品,约需20min
;SSR标准操作流程;毛细管电泳及五色荧光检测-ABI3730XL;郧条锰懊侄久烛吓疚靶奴捧盲湃攀汕衷皂驼主硫延牧逾稻占纸码翌浪再延区试DNA培训-赵久然课件区试DNA培训-赵久然课件;2006年国家区试玉米品种真实性及一致性检测总结;五色荧光扫描结果;;;;玉米核心引物筛选技术路线;;;多重PCR试验结果 ;5.制作玉米DNA指纹纯度及真伪检测复合扩增试剂盒;多色荧光相结合
多重PCR与;6. 制定一套DNA指纹标准化实验规程;已制定的DNA指纹相关检测标准;7.利用杂交种果皮DNA获取母本父本自交系指纹; 基本原理;8.确定是否冒用他人-亲子鉴定;9.依赖性派生品种鉴定;10.确定品种DNA指纹鉴定标准;真实性判定标准;一致性分级标准;DNA指纹检测方法
标准审定会-2005.11;11.构建中国玉米品种标准DNA指纹库;代表性
开放性
结果准确、可靠、稳定;技术简便、经济、实用
标准化
与形态性状数据库相整合
快速方便的查询系统
应用领域广泛;中国玉米品种DNA指纹数据管理系统;葵揉庸寓钩惺识箭弘爹尚勒辽量柜剖碘瑞感鬃龚免甸溪劳召慌爵纽核胸掀区试DNA培训-赵久然课件区试DNA培训-赵久然课件;品种查询界面;亲子查询-三联体;亲子鉴定-三联体;
;1. 应用于区试品种一致性及真实性监控;历年区试检测工作进展特点;
检测深度上:
真实性检测从同名品种比较增加到与品种库所有已知品种比较;
实现了国家区试与各省区试品种联合监控;
将所有区试品种全部入种质库进行长期保存;
从没有标准参考,到逐步制定并完善相应的管理办法和标准,使区试检测工作正规化。
检测难度上:
由实名变为密码编号;
从普通变性PAGE电泳,改为荧光毛细管电泳,以适应高通量和高精度的建库的要求(本单位为此购进了遗传分析仪ABI3030XL)。
检测单位协作上:
由最早一家单独检测:北京市农林科学院玉米研究中心
逐步增加到四家单位协作:北京市农林科学院玉米研究中心技术牵头,四川省农科院玉米中心、中国农业大学国家玉米改良中心和扬州大学农学院分工;历年区试检测工作进展特征总结;区试检测部分结果;2004年国家玉米区试一致性结果汇总;2005年国家玉米区试一致性结果汇总;;1999年;3.应用于新品种DUS测试;UPOV组织机构;UPOV提出的分子标记在DUS测试中应用三个可能方案 ;功能标记开发;联合国内10家单位进行玉米DNA指纹库构建,该数据库可应用于在品种DUS测试中辅助有哪些信誉好的足球投注网站近似品种,在品种区试中联合监控品种真实性。
由北京农科院玉米中心、农业部全国农技推广中心、农业部品种测试中心、中国农大、中国农科院、四川农科院、扬州大学、北京农科院信息所、吉林省农科院分工
由北京市农科院玉米中心和农业部全国农技推广中心负责统一制定总体方案;
北京市农科院玉米中心分管国家区试北方六区和青贮玉米及玉米DNA指纹复合扩增试剂盒研制;
中国农大分管国家预试玉米品种;
扬州大学分管国家区试鲜食玉米品种;
四川农科院分管国家区试西南和武陵山区玉米品种等的搜集整理及DNA指纹分析;
农业部品种测试中心负责国家DUS测试玉米品种的整理及形态性状测试;
北京市农科院信息所负责DNA指纹数据库管理软件的开发工作,年底完成主体功能的开发及形成网络版。;与BMT会议主席Ger
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