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布病病原学及实验室诊断;布鲁氏菌病; 布病病原学及实验室检验; 发现和分类位置; 1.1 布氏菌的发现;;分类;陕西省布鲁氏菌病病原学调查分析;1.2形态和培养特征;鹃批碰刚灼鄙甥寓僧霸徊庚魁铱儒垫左却毛诸窟鞘锌酿吃卉轻共圃普滨止布病实验室技术培训布病实验室技术培训;1.2培养特性;1.3抵抗力;不 同 温 度 对 布 鲁 氏 菌 影响;布鲁氏菌对消毒剂的抵抗能力;不同环境中的抵抗能力; 现已证明，布鲁氏菌对四环素最敏感，其次是链霉素，而对枯草杆菌肽、多黏菌素B、多黏菌素M素等有很强的抵抗力。;布氏菌的抗原、毒力; 布氏菌的抗原成分十分复杂，存在A、M、G成分。A对牛种布氏菌有特异性，M对羊种布氏菌有特异性，G为两种菌共有。还与多种细菌存在共同抗原，因而有血清交叉反应。布氏菌不产生外毒素，只产生内毒素，有致热、致炎作用，可导致休克。;从种上来说，羊种毒力最强，猪种和牛种次之，犬种的毒力很弱，几乎不引起人致病。;由于菌种毒力等因素的不同，患病后的临床表现也不完全一样。 羊 种布鲁氏菌的毒力最强,患者中毒症状严重，多有典型的发烧、多汗、头痛、虚弱、关节痛、肝脾及睾丸肿大等急性症状。 猪种、牛种次之。 犬种的毒力很弱，几乎不引起人致病。 ;布氏菌实验室检验;诊断布病的金标准。 3.1.1实验室要求 布氏菌的分离培养要在生物安全二级以上实验室中进行。 布氏菌是高致病性病原微生物，从危害程度来说为第二类病原微生物。;3.1.2方法 采样（采血） 双相培养基 菌株鉴定 （菌落形态观察、涂片、染色、镜检布氏菌诊断血清玻片凝集试验） 种型鉴定（CO2需要与否、H2S的产生的测定、染料抑菌试验、单项因子血清凝集试验、噬菌体裂解试验等等） ; 3.1.3 布氏菌培养特性 布氏菌是需氧或微需氧菌 生长缓慢，尤其初代分离 牛种部分型别、绵羊附睾种布氏菌需在5-10% CO2环境中培养 新长出的菌落无色透明，光滑圆形，突起，均质，直径1-2mm 液体培养均匀混浊，无菌膜 粗糙型菌落较大，生长快;布鲁氏菌培养材料;布鲁氏菌的培养;瞄描提敖柜氟驴祈椎莲模侠彬淳娇绅痞裳摆惩链锤忠组炼寇简菜之恬柒主布病实验室技术培训布病实验室技术培训;布氏菌特异的油滴样菌落;布氏琼脂布鲁氏菌菌落;血平皿 布氏菌菌落;布氏菌革兰染色;3.1.6布氏菌鉴定程序;布氏菌噬菌体;噬菌体对布氏菌的裂解;羊种布氏菌噬菌体裂解;分离培养基;布氏菌培养鉴定;双向血培养瓶;戏缅驹阿貌程受渊孩挡抵索态款坐扑祸轨娱惰破似疲冬耕抒裤赖抛案恫把布病实验室技术培训布病实验室技术培训;血清学检验; 3.2.1 血清学诊断的意义 ;3.2.2 针对布病进行的检验;虎红、平板凝集试验和皮内变态反应供初筛试验用 对已确诊的慢性病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效价高低，皮内变态反应强弱供参考;布氏菌的血清学诊断方法;3.2.2.1、虎红玻片凝集实验;溶疯楷废衙慑医锯趾趣简沧膜杭西让坎削哑通伪遥侧痉妇霍讫哥曝毫阴网布病实验室技术培训布病实验室技术培训;布病虎红玻片凝集试剂;试剂与器材;注意事项;原理：布氏菌侵入机体后，就会刺激机体产生特异性抗体，这种抗体可与相应的布氏菌抗原发生特异性结合，在电解质的作用下，就会形成肉眼可见的凝集反应，也就是用已知抗原查未知抗体。;3.2.2.2、 试管凝集试验;试管凝集试验 阴性;布氏菌试管凝集 阳性;布氏菌试管凝集抗原;???材与试剂;0.2ml血清;比浊管的制备;结果判定： 根据各管中上层液体的清亮度记录凝集反应程度（滴度），特别是50%清亮度（++）对判定结果关系较大，一定要与比浊管对比判定。 ++++ 液体完全透明，菌体成伞状沉淀或块状颗粒状沉淀，呈100%凝集。 +++ 液体近于完全透明，菌体成伞状沉淀，呈75%凝集。 ++ 液体略微透明，菌体呈较薄伞状沉淀，呈50%凝集。 + 液体不透明，管底有很不明显的伞状沉淀，呈25%凝集。 — 液体不透明，无伞状沉淀。 效价以产生50%凝集的血清最高稀释倍数为受检血清的效价。 血清对照为清亮透明无沉淀，抗原对照为均匀浑浊，两种对照管成立，才可判定试验管，否则重做。 人的诊断标准：1:100++为阳性，1:50++为可疑。;试管凝集实验的评价;注意事项;3.2.2.3、抗人球蛋白实验（Coomb’s）;器材及试剂;对照;注意事项;评价;3.2.2. 4、布氏菌补体结合试验;补体试验的5种成分;补体结合试验注意事项;3.2.2.5、皮肤变态实验;3.2.2.6、酶联免疫吸附试验（ELISA）;酶联免疫吸附试验注意事项;3.2.3 血清样本的采集和保存;实验时的无菌操作 妥善保存有意义的样