半枝莲黄酮课件.pptxVIP

结合半枝莲浅谈黄酮类化合物的提取、分离纯化和含量测定; 主要内容： 一、黄酮类化合物的简述 二、黄酮类化合物的提取 三、黄酮类化合物的分离和纯化 四、黄酮类化合物的含量测定 五、参考文献 ;一、黄酮类化合物的简述; 黄酮类化合物具有抗氧化及清除自由基作用，抗癌、抗肿瘤作用，抗菌、抗病毒作用，抗衰老及DNA保护功能，抗心脑血管疾病的作用，调节内分泌系统的作用，抗炎、镇痛作用等。[5] 其中，具有抗癌作用的成分是我们课题研究的重点。 焦燕[6]对半枝莲分离纯化得到了野黄芩素、木樨草素、芹菜素和4-羟基汉黄芩素，并通过MTT活性实验，发现四种化合物对Hela细胞有一定的抑制作用。;二、黄酮类化合物的提取;1.溶剂提取 1.1水提取 黄酮类化合物的水提取法是一种较传统的方法，主要用于黄酮苷类的提取。因提取率低, 提取物中杂质较多( 如无机盐、蛋白质、糖类等),后续分离麻烦, 现在很少单独使用该方法。 1.2碱性水或碱性稀醇提取法 黄酮类化合物大多具有酚羟基, 易溶于碱水, 酸化后又可沉淀析出。因此可用碱性水(碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液) 或碱性稀醇(50%乙醇)浸出, 浸出液经酸化后析出黄酮类化合物。[7];1.3有机溶剂提取 常用的有机溶剂有甲醇、乙醇等, 一般采取乙醇为提取溶剂。高浓度的乙醇(如90% -95%) 适于提取苷元, 浓度 60 % 左右的乙醇适于提取苷类。提取次数一般为 2-4 次, 提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。 [8] 邸多隆等[9] 用正交实验法优选半枝莲提取工艺,以浸膏得率、总黄酮和野黄芩苷提取率为评价指标,选择乙醇浓度(%)、加醇量(倍)、提取时间(h)为考察因素,利用正交试验确定了醇提取半枝莲的最佳工艺条件为75%乙醇10倍量提取2.0h,共提取2次,平均乙醇浸膏得率为13.6%,总黄酮和野黄芩苷提取率分别为91.7%和78.4%。 ;2.超声提取法 原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出。 [10] 陈莉华等[11] 通过单因素和正交试验获得超声波辅助乙醇提取半枝莲黄酮的最佳工艺条件是乙醇体积分数为50%，料液比1:30( g/mL)，超声提取时间25min，浸泡温度65℃，此时黄酮的得率为3.0%。 ;3.微波提取法 原理是利用磁控管所产生的超高频率的快速震动, 使材料内分子间相互碰撞、挤压, 利于有效成分的浸出。[7] 薛梅等[12]从半枝莲运用微波技术提取半枝莲总黄酮,反应速度加快,提高了提取效率,测得半枝莲中总黄酮含量为3.74%。 ;4. 酶解法 原理是通过酶的作用裂解植物细胞壁, 使得植物次生代谢产物充分得到释放, 从而提高药用成分得率一种分离提取方法。[13] 庞允[14] 在研究银杏叶中黄酮的提取工艺时发现，酶解法同乙醇提取法相比,黄酮的提取率由1.29%提高为1.78%。;5. 半仿生提取方法 半仿生提取法，是从生物药剂角度，模仿药物在肠胃转运过程所经历的环境，模拟pH溶液依次提取，从而得到含黄酮成分的混合物。 [15] 陈丛瑾等 [16]利用半仿生提取法分别以pH 2盐酸溶液和pH 7.5、 pH 8.5 的氯化铵- 氨水的缓冲溶液作为提取液提取香椿叶中的总黄酮,提取量为10.3417 mg / g。;6. 超临界流体萃取法 超临界流体萃取是利用超临界流体的特殊性能进行萃取的一种高效提取分离技术。与传统的中药有效成分的提取技术相比,超临界流体萃取技术具有许多独特的优点,因而成为中药现代化的关键技术之一。 孙婷[17]用超临界CO2法萃取银杏叶黄酮：萃取压力20 MPa，萃取罐的温度40 ℃，夹带剂流量14 mL/min，萃取2 h，得总黄酮的含量为29.1 %。;三、黄酮类化合物的分离和纯化;1.硅胶柱色谱法 此法应用范围最广，不仅可以分离黄酮苷, 还可以分离各种苷元。分离苷元时常用氯仿-甲醇混合