人幽门螺杆菌（H.pylori）抗体酶联免疫分析（ELISA）.PDFVIP

人幽门螺杆菌 (H.pylori)抗体酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关 液体样本中幽门螺杆菌 (H.pylori) 抗体水平。 实验原理： 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法 （ELISA ）测定标本中人幽门螺杆菌 (H.pylori)抗 体。用纯化的幽门螺杆菌(H.pylori)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中幽门螺杆 菌(H.pylori)抗体相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP 标记的幽门螺 杆菌(H.pylori)抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪 在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF 值相比较，从而判定标本中(H.pylori) 抗体的存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48 ） 2 片（96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×20 倍）×1 瓶 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 1 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分 钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS ，PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备