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原生动物伪红色双轴虫细胞纤毛器微管胞器的直接荧光标记
中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 397-401 http ://www.cj
原生动物伪红色双轴虫细胞纤毛器微管
胞器的直接荧光标记
运迷霞 张 萌 李其利 陈季武 顾福康*
(华东师范大学生命科学学院, 上海200062)
摘要 应用荧光紫杉醇直接荧光标记法显示, 原生动物纤毛虫伪红色双轴虫(Diaxonella
pseudorubra )细胞纤毛器微管中, 口围带基部含小膜托架及与托架相联系的肋壁微管; 额腹横棘毛
基部含前纵微管束、后纵微管束、横微管束和周围微管束, 其微管在不同棘毛基部的定向和发达
程度不一; 缘棘毛基部含前纵微管束、后纵微管束。细胞形态发生过程中, 前仔虫口纤毛器微管独
立发生于老口围带内侧, 在细胞形态发生末期新纤毛器微管形成时, 尚有部分老额棘毛、横棘毛和
缘棘毛残存, 此后老结构逐渐被吸收。结果表明, 伪红色双轴虫的纤毛器基部微管的分化很可能具
有种属级的特异性, 新纤毛器微管分化过程中老结构可能具有定位和物质贡献作用。
关键词 伪红色双轴虫; 皮层纤毛器; 微管胞器; 荧光紫杉醇标记
原生动物是最简单的真核生物, 一个原生动物 年10月采自南京市郊区。其形态学特征与Berger[6]
(
体就是一个真核细胞。但原生动物细胞 尤其是纤 报道的相一致, 为此定名为该种。细胞长约160 mm 、
)
毛虫作为一个完整的生物体经历了长时期进化过 宽约40 mm, 呈长椭圆形, 整个皮层细胞质内遍布红
程, 其细胞的复杂程度是多细胞生物中的一个细胞 色色素颗粒。分离后, 应用麦粒液发酵富集的细菌
[1]
远不能及的 。纤毛虫细胞具有复杂的皮层微管结 作为饵料, 建立纯系培养。将纤毛虫培养至较高密
构。目前, 对体纤毛排布分散的较低等草履虫(Para- 度后, 取生长状态良好的细胞作为实验材料。
mecium) 、四膜虫(Tetrahymena)基体微管装配中老结 1.2 方法
构的作用、微管蛋白的变化, 及与轴丝微管装配相 参照荧光紫杉醇(fluorescence taxoid, FLUTAX)
联系的微管组织中心等方面有深入的了解[2,3], 但在 直接荧光标记方法[7~9], 并调整为: ①将高浓度的细
微管水平, 对纤毛基体紧密聚集排列的纤毛器基体 胞滴入浓度为0.5% 的皂苷中渗透10 min, 用PHEM
微管的装配和基体微管装配在细胞内的启动及发生 1 4% 5 min PHEM 1
清洗 次; ② 多聚甲醛固定 , 清洗 次;
过程尚不清楚。为此, 作者所在实验室以腹毛目纤 1 mol/L FLUTAX-2(Sigma) 5 min 0.01 mol/L
③ m 染色 ,
毛虫的纤毛器微管胞器为对象, 采用直接荧光标记 PBS 3 Olympus BX
的 漂洗 次, 封片。 荧光显微镜观察,
和免疫荧光标记的方法, 在对贻贝棘尾虫(Stylony- Cool SNAP -Pro数码相机照相。
chia mytilus) 、魏氏拟尾柱虫(Paraurostyla weissei)
等[4,5]进行观察的基础上, 对含有色素颗粒的伪红色
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