17种氨基酸混合溶液标准物质的研制.pdf

维普资讯 17种氨基酸混合 一 、 氨基酸混合溶液标准溶液的制备 性好、准确度较高等特点。因此 ，在均匀性和稳定性检验过 1．实验仪 器与试剂 程中，我们采用了柱后茚三酮衍生色谱法。 实验中使用的仪器为氨基酸分析仪(L-8800，Hitachi)。 1．氨基酸混合溶液 的均 匀性检验 氨基酸纯度标准物质由中国计量科学研究院化学所 (原国 通过对文献的查阅和结合实验过程 ，我们发现在盐酸 家标准物质研究中心)提供。实验 中所使用的水~Millipore 溶液f0．1mol／L)中只有酪氨酸和胱氨酸的溶解性差 ，而其他 纯水器制备 ，盐酸 (北京化学试剂研究所)为分析纯 ，经过 的溶解都很好．所以在考察溶液均匀性的过程中选取以上 重蒸处理后使用。本实验中所使用的其他化学试剂如柠檬 两种氨基酸为代表进行检验 ．通过比较其峰面积的变化进 酸钠 、柠檬酸 、氯化钠等均为分析纯 ，分别购 白Sigma公司 而判定溶液的均匀性。具体做法如下 ：在配制的同一批次 和Merck公司 的氨基酸混合溶液中我们选择 l1个样品做瓶间均匀性评 2．氨基酸混合溶液的配制 价 ，同时从其 中任取 1瓶取 7个子样做瓶 内评价 ，在95％ 首先将氨基酸在105~C烘箱中干燥．随后在保干器内冷 的置信概率下采用隘 验和t检验考察样品的均匀性。其结 却至室温后准确称取一定量的样品，并将其转移至1L容量 果如表 1所示。 瓶中。然后使用经灭菌处理后的盐酸溶液(0．1molL／)溶解样 2．氨基酸混合溶液的稳定性检验 品，最后在20 条件下定容。溶液浓度采用式(1)计算 ： 稳定性是指在一定时间内，在外界环境的影响下，物 c： mxp 质的物理和化学特性保持不变的能力。在本实验过程中， 针对调研 中我们所了解到的氨基酸混合溶液在一定的条 式 中：C-__一溶液 的摩尔浓度 。mol／L； 一 氨基酸纯 件下具有较长的稳定性 的特点，我们选择了如表2中所示 度标准物质 的质量 ，mg； 氨基酸标准物质 的纯度 ； 的4个时间段进行稳定性考察。通过 比较在相同条件下不 肛一 氨基酸的摩尔质量 ．gm／ol；Z——溶液体积 ，L。 同时间段配制的17种常见氨基酸溶液浓度值的变化 ，衡量 二、氨基酸混合溶液的均匀性和稳定性检验 其稳定性 。 目前 ．多组分氨基酸的分析方法主要有柱前衍生液相 从表 2中可以看出，在 14个月内，氨基酸混合溶液的 色谱法 、离子色谱法、柱后茚三酮衍生色谱法等。其中，柱后 量值没有发生明显的趋势性变化 ，这说 明我们所采取的配 茚三酮衍生色谱法时间最长 、技术最为成熟，具有结果稳定 制方式和储存条件有效地保证了氨基酸量值的稳定性。 三、不确定度分析 通过氨基酸混合溶液标准物质的制备过程 ，其不确定 氨基酸是指 同一类分子 内具有羧基和氨基的化合 度主要由三个方面构成：①氨基酸纯度标准物质本身带来 的不确定度．此部分经转化成标准不确定度后引用；② 由 物的总称 ．是构成蛋 白质分子的基本单元。它与生物的 溶液稳定性所带来的不确定度，通过观察发现实验结果无 生命活动密切相关 ，在抗体 内具有特殊 的生理功能，是 方向性变化 ，所以此部分所带来的不确定度贡献可忽略不 生物体不可缺少的营养成分 。是生命代谢的物质基础 。 目前 ．氨基酸的研 究、开发和应用均取得 了重大进展。氨 计；③在配制过程中引入的不确定度。经分析，