基因工程基础知识填空.docVIP

专题一 基因工程 1. 1 DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的基本概念 1. 概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过_____________和___________等技术，赋予生物以新的__________，从而创造出更符合人们需要的新的__________和___________。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做_________________。 (2. 基本原理：______________ (3. 理论基础 (1) 不同生物的基因可以拼接的结构基础——细胞生物的遗传物质都是_______，都是以_____________为基本单位构成的双链大分子。 (2) 目的基因转入后可以表达的基础——所有生物共用一套__________。 (3) 生物遗传信息的表达都遵循_________。 ((4. 优点 (1) 目的性强，能_______的改造生物的性状。 (2) 克服________________的障碍。 二、限制性核酸内切酶——分子手术刀 1. 简称：__________。 2. 来源：主要是从__________中分离纯化而来。 (3. 功能特点：特异性，即识别双链DNA分子某种特定__________，并且使每一条链中____________的两个核苷酸之间的_________断开。 4. 酶切结果：_______末端和_______末端。 画出EcoRⅠ酶切后的结果： ↓ GAATTC CTTAAG ↑ 三、DNA连接酶——“分子缝合针” (1. 作用实质：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的________。 2. 作用前提：两个DNA分子必须含有_________。 3. 种类 (1) E·coli DNA 连接酶 ① 来源：___________ ② 功能：只能连接___________ (2) T4DNA连接酶 ① 来源：____________ ② 功能：既可以连接___________，又可以连接_________，但连接_________时效率比较低。 (【拓展】 比较DNA连接酶与DNA聚合酶 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 作用 实质 都是催化两个核苷酸之间形成_______ 是否 需模板 _______ _______ 连接 DNA链 ____链 ____链 作用 过程 在两个DNA片段之间形成__________ 将_________加到已存在的核苷酸链上，形成____________ 作用 结果 将两个DNA片段连接成__________ 合成___________ 四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1. 基因工程中最常用的载体——_______ (1) 来源：________等微生物 (2) 结构：裸露的、结构简单、独立于___________ 之外，并具有____________的___________分子。 (2. 基因的载体必须具备的条件 (1) 有______________个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。 (2) 能在宿主细胞内_________，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行________。 (3) 有特殊的___________，如四环素抗性基因等，供重组DNA的鉴定和选择。 (4) 必须是______的，不会对受体细胞有害。 (5) _______适合，以便提取和在体外进行操作。 3. 载体的种类：除质粒外，还有____________、__________________等。 4. 在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过_________的。  1. 2 基因工程的基本操作程序 (一、基因工程的基本操作程序 1. _____________的获取。 2. _____________的构建。 3. 将目的基因_____________。 4. 目的基因的_____________。 二、目的基因的获取 1. 目的基因主要是_________的结构基因。 2．获取目的基因的方法 (1) 从基因文库中获取目的基因 ① 基因文库概念：将含有某种生物不同基因的许多__________，导入_______的群体中储存，各个_______分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 (② 基因文库分类：可分为______文库和________文库(如cDNA文库)。 (2) 利用PCR技术扩增目的基因 ① PCR技术是_____________的缩写。PCR是一项在生物体外___