寄生虫学教研室燮塑墨戴世忠R j.PDFVIP

维普资讯 广东医学院学报 1993年第 11卷第 3期 JOURNALOFGUANGDONGMEDICALCOLLEGEVol 97 三种免疫血清学方法检测弓形虫抗体的比较。 寄生虫学教研室 燮 塑墨 戴世忠 R j [提要)用斑点酶联竞燕吸附试验、垒葡酋A 蛋 白碑联竞疫吸附试验及间接血球凝集试验三种 血清 学方法检涮 弓形虫感染 鼠血请及健康 鼠皿清各 100骨 ．平均 阳性率舟别为 96．O 、94．0 和 88．0 ，平均假阳性宰舟别为4．0 、7．0 及 8．0 }檀测 lO份 阿米 巴肝脓肿病人血清及 20骨 日 本血暧虫感染兔血清，平蚜麦又反应率分别为 3．3 、10．0 及 13．3 。结是表明，三法对 弓形虫特 异性抗体的拴涮均有较好的敏感性、特异性、重现性及较低的交又更应率．三法中tH班点酶聪竟 疫吸附试验的敏感性最好 ，且有省试剂 反应侠、攮作筒便等优点，是一种覆有实用价值前景的竞 疫谬帝方『法 · 惦 关键词 堕；堂整堡 ；丕垂鲢拉盎；栈体世州 弓形虫病是一种世界性分布的人畜共患 挂 弓1弓形体株感染小 白鼠的腹腔渗出物 ， 病，感染极为普遍 沣 别是先天性和获得性 弓 注射体重约 Z0g的健康小 白鼠腹腔 内，每只 形虫病．对人的危害极大．同时也给畜牧业带 注射 0．1ml。接种 3～4天后．扑杀感染发病 来严重的经济损失，因此．研究弓形虫感染的 鼠．注入 1．5～2．0ml灭菌生理盐水井按摩 免疫和免疫诊断技术具有重要意义。由于 弓 腹部，吸出腹腔洗涤液，经 3000g×15min离 形虫病的临床表现较复杂．且以病原体来确 心 ．弃去土清液．取沉积物用灭菌生理盐水洗 诊较困难，因此 目前 弓形虫病的诊断主要依 涤 3次 ，向沉 积 物 加 入 30～ 40倍 量 的 据血清学方法检测特异性抗体 “。国内目前 0．2MpH7．6、0．25 胰蛋 白酶磷酸缓冲液． 大多采用常规间接血球凝集 试验 (IHA)，而 混匀 ，放在 37℃水浴 中消化 20min．消化后用 IHA 则属 于 中度敏感性 的血清 学诊断方 灭菌生理盐水离心洗涤 5次．沉积物再加胰 法 。本文是采用斑点酶联免疫吸附试验 蛋白酶重复消化 1次．并离心洗涤 3次，沉积 (Dot—ELISA)、金葡菌 A蛋 白酶联免疫吸附 物按 1t9加入无菌双蒸水 ，混匀放入一2O℃ 试验 (SPA—ELISA)对 弓形虫感染 鼠血清进 低温冰箱及 37℃水浴箱 内反复冻融 5次．再 行特异性抗体的检测．并与 IHA 比较．旨在 经 3000g×3Omin离 心 ．取上清液加等量 研究这三种血清学方法的敏感性、特异性 、交 1．7 盐水制成可溶性抗原 ，蛋 白含量经 751 叉反应性和重现性 ，以寻找准确 、快速、经济 型紫外分光光度计测定为 3．85mg／ml。一 和有实用价值的免疫诊断方法。 20~C低温冰箱保存备用。 二、血清：弓形虫感染 鼠血清为经腹腔注 材料和方法 射 0．1ml病 鼠腹腔渗 出物后 4天小 鼠血清 100份，日本血吸虫感染免血清 2O份，阿米 一 、 抗原：弓形虫速殖子可溶性抗原系取 巴肝脓肿病人血清 l0份，健康 鼠血清 100 · 学院青年科学基金资助课题部分工怍