动物药矿物药的分析.PPTVIP

第六章 动物药、矿物药的分析 1、牛黄及其制剂的分析中，掌握胆汁酸的化学反应，胆红素化学反应，人工牛黄的定性鉴别，人工牛黄的含量测定，熟悉含牛黄制剂分析 3、熟悉麝香、蛇胆、蟾酥、雄黄、朱砂及其制剂的分析的定性鉴别，含量测定 4、熊胆及其制剂的分析，掌握熊去氧胆酸的定性鉴别，熊胆中结合胆汁酸含量测定 5、熟悉其他矿物药的分析 第一节 含动物药中药制剂的分析 一、牛黄及其制剂的分析 胆红素 溶解性：不溶于水，溶于苯、二硫化碳、氯仿、碱液、微溶于乙醇、乙醚，其钠盐易溶于水，不溶于氯仿，其钙盐、镁盐不溶于水 性质：在碱溶液中或遇三价铁极不稳定易氧化 稳定性：天然胆红素在提取过程中，受酸碱的影响，双吡咯环产生异构化，即胆红素-Ⅸa,胆红素-Ⅲa,及胆红素—ⅩⅢa。胆红素Ⅸ，是天然产物的原型物(bilirubin-Ⅸ。) 另含脂类，蛋白质、肽、氨基酸类，无机元素等 我国部颁标准中人工牛黄的质量标准 组成：胆酸、胆红素、胆固醇与无机盐等配合而成。 含量：胆酸：标示量的90%～110%。总胆酸25%，胆红素含量90% 性状：人工牛黄应为黄色疏松的粉末，味苦，微甘 (一) 胆汁酸的化学反应 1.Pettenkofer 反应　 蔗糖 浓硫酸 羟甲基糠醛+胆汁酸→紫色 糠醛+胆汁酸 浓硫酸→红色 2. Gregory Pascoe 反应（可作胆酸定量反应） 糠醛+胆汁酸 浓硫酸 羟甲基→胆酸溶液显蓝色 3. Hammarsten反应　铬酸(醋酸+盐酸)+胆酸类 胆酸、阿朴胆酸及3α，12α-二羟基-Δ’-胆烯酸呈紫色； 去氧胆酸和鹅去氧胆酸呈阴性反应； 3-酮基-7α，12α-二羟基胆烷酸呈黄色→绿色→紫色； 3α，12α-二羟基-7酮基肥烷酸显黄色 (二) 胆红素的化学反应 （1） 重氮化反应：胆红素+重氮化试剂(对氨基苯磺酸重氮盐) →呈色（比色法含量） （2） Gmelin反应：+硝酸 →呈绿、蓝、紫、红、黄等颜色环 (三) 人工牛黄的定性鉴别 （1） +硫酸+过氧化氢→绿色； （2） +糠醛+硫酸→蓝紫色。 （3） 显微鉴别 （4） 453 ±2 nm （5）人工牛黄与天然牛黄的IR吸收光谱有明显差别：天然牛黄在745～755cm-１、980～990cm-１、1240～1250cm-１、1565～1570cm-１、1620～1630cm-１、1655～1665cm-１，处均有明显吸收峰　　 (四) 人工牛黄的含量测定 1. 胆酸的含量测定 　　标准曲线制备 Gregory Pascoe 反应 　　样品测定 2. 总胆酸的含量测定　　酸碱滴定法 3. 胆红素的含量测定　　重氮化试液显色法 部颁标准测定法：在453 士2nm处测定吸收度，按C33N4O6的E为1038计算 (四) 人工牛黄的含量测定 4. HPLC法测定胆红素的含量 氯仿-1%盐酸甲醇溶液(5:1)为溶剂：牛黄中的胆红素以钙盐形式存在，游离型胆红素不溶于水，易溶于氯仿 超声处理数分钟：以便游离型和结合型的胆红素均能溶出 (五) 含牛黄制剂的分析 1. 牛黄珍珠胶囊中胆红素的测定 　　在453 ±1nm波长处测定吸收度，按胆红素C33H36N4O6吸收系数(E)为1083计算含量 2. 牛黄降压丸中胆酸和去氧胆酸的测定 　　薄层扫描法 3. 六神丸中胆酸、猪去氧胆酸的测定 反相高效液相色谱法 胆汁酸类成分衍生化法：胆汁酸结构中缺乏共轭结构，无近紫外吸收生色基团，一般高灵敏度的紫外检测器或荧光检测器不能检测。利用衍生化技术，使胆汁酸类成分形成对硝基苯甲酸甲基酯，在254mm波长处检测 方法：精密吸取胆汁酸适量置反应瓶中，加氢氧化钾试液100μl，蒸干，加18-冠醚-6-试液和1-溴乙酰基对硝基苯(l-bromoacetylnitrobenzene) (简称BANB)衍生试液各100μl，密塞，立即放入已恒温至60℃的烘箱中，加热40分钟，取出冷却至室温，即可进样 * 　　 天然牛黄，人工牛黄所含成分 胆酸(cholic acid, CA)：mpl98℃、pK= 6.4 、溶解度0.28 g/L(水)、30.5 g/L( 乙醇)、1.22 g/L(乙醚)、5.0 g/L(氯仿)、0.36 g/L(苯)、28.24 g/L(丙酮)、胆酸钠盐568.98/L(水15℃) 。 　 去氧胆酸(deoxycholic acid,HDCA)：mp 176～178℃、pK = 6.58、溶解度1:4(冷乙醇)、0.248/L(水)、0.128/L(苯)、10.468/L(丙酮)、去氧胆酸钠盐＞333 g/L(水15℃) 。 (4) 薄层色谱鉴别： 胆酸的鉴别：供试液：样品粉末10mg，加氯仿20ml，超